2) 37
3) 42
4) 30
Верная температура — 25 °C. При исследовании пищевых продуктов на патогенные Yersinia enterocolitica исходную суспензию в бульоне PSB, содержащем пептон, сорбитол и соли желчных кислот, инкубируют при 25 °C в течение 44 ± 4 часов без перемешивания. Такой режим предусмотрен стандартным методом выявления патогенных иерсиний в пищевой цепи.
Выбор температуры основан на психротрофных свойствах иерсиний: эти бактерии способны размножаться при пониженной температуре, а наиболее интенсивный рост многих штаммов наблюдается приблизительно при 25–30 °C. Инкубация при 25 °C способствует восстановлению сублетально повреждённых клеток возбудителя и накоплению их количества до уровня, достаточного для последующего выделения на селективных средах. Одновременно уменьшается конкурентное преимущество ряда мезофильных микроорганизмов пищевого продукта, оптимально растущих при 35–37 °C.
Температура 30 °C применяется преимущественно на этапе инкубации посевов на CIN-агаре, а не для первичного обогащения. Режим 37 °C может снижать эффективность накопления небольшого количества иерсиний на фоне сопутствующей микрофлоры, тогда как 42 °C используется при выделении некоторых термофильных или термотолерантных бактерий и для Yersinia не подходит.
| Этап исследования | Среда или метод | Температурный режим | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Приготовление исходной суспензии | Бульон PSB | 25 °C, 44 ± 4 ч | Первичное накопление и восстановление жизнеспособных клеток иерсиний |
| Селективное обогащение | Бульон ITC | 25 °C, 44 ± 4 ч | Повышение доли иерсиний относительно сопутствующей микрофлоры |
| Прямой посев исходной суспензии | CIN-агар | 30 °C, 24 ± 2 ч | Получение изолированных колоний без предварительного длительного накопления |
| Высев после обогащения | Обработка KOH и посев на CIN-агар | 30 °C, 24 ± 2 ч | Подавление части фоновой флоры и выявление характерных колоний |
| Холодовое обогащение | Специальный холодовой бульон | Около 4 °C | Дополнительный длительный метод, использующий психротрофность иерсиний |
| Инкубация при температуре тела | Отдельные подтверждающие тесты | 37 °C | Может применяться при идентификации, но не является режимом первичного обогащения |
| Термофильный режим | Методы для других возбудителей | 42 °C | Не обеспечивает оптимального накопления Yersinia enterocolitica |
После обогащения материал высевают на селективный CIN-агар, где подозрительные колонии обычно имеют тёмно-красный центр и прозрачную периферическую зону — вид бычьего глаза . Морфология колоний служит только ориентировочным признаком и не подтверждает патогенность изолята. Окончательную идентификацию проводят с помощью биохимических тестов и молекулярных методов, включая выявление ассоциированных с вирулентностью генетических маркеров. Соблюдение установленной температуры на этапе обогащения непосредственно влияет на чувствительность всего бактериологического исследования.