2) субстрат-адаптированных
3) адаптивных
4) конституитивных (+)
Правильный ответ — конститутивные ферменты. Они синтезируются бактериальной клеткой постоянно или относительно постоянно, независимо от присутствия специфического субстрата-индуктора. Поэтому в исследуемой культуре уже имеется готовый фермент, который после добавления соответствующего субстрата немедленно катализирует реакцию с образованием окрашенного, газообразного или иного регистрируемого продукта.
На выявлении таких пресинтезированных ферментов основаны быстрые реакции на оксидазу, каталазу, гидролиз гиппурата и индоксилацетата. Эти тесты не требуют предварительного размножения микроорганизма в среде с индуктором и длительного накопления фермента, поэтому результат обычно получают в течение нескольких минут или десятков минут. В частности, гидролиз гиппурата используется для дифференциации типичных штаммов Campylobacter jejuni от C. coli, а реакция с индоксилацетатом служит дополнительным признаком при идентификации кампилобактеров.
Термин эндогенный указывает лишь на внутриклеточное происхождение вещества и не характеризует регуляцию его синтеза. Адаптивные, или индуцибельные, ферменты образуются преимущественно после контакта клетки с определённым субстратом; поэтому основанные на них реакции могут требовать предварительной инкубации. Конститутивность ферментного признака обеспечивает быстроту теста, однако видовую идентификацию следует оценивать по совокупности морфологических, культуральных и биохимических характеристик.
| Тест или признак | Выявляемая ферментативная активность | Типичный результат | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Оксидазный тест | Цитохром-c-оксидаза | Быстрое окрашивание реактива | Большинство клинически значимых кампилобактеров оксидазоположительны |
| Каталазный тест | Расщепление пероксида водорода каталазой | Появление пузырьков кислорода | Используется в комплексе признаков; выраженность реакции может различаться между видами |
| Гидролиз гиппурата | Гиппуриказа с образованием глицина и бензоата | Положительная цветная реакция после добавления проявляющего реагента | Характерен для большинства штаммов C. jejuni и помогает отличать их от C. coli |
| Гидролиз индоксилацетата | Эстеразная активность | Образование синего или сине-зелёного продукта | Быстрый дополнительный тест для дифференциации видов Campylobacter |
| Уреазный тест | Уреаза | Ощелачивание среды вследствие образования аммиака | Обычно отрицателен у энтеропатогенных кампилобактеров; положительный результат требует рассмотрения других таксонов |
| MALDI-TOF MS или видоспецифическая ПЦР | Белковый спектр либо специфические нуклеотидные последовательности | Видовая идентификация по базе спектров или генетической мишени | Применяются для подтверждения атипичных или противоречивых биохимических результатов |
Ферментативные экспресс-тесты выполняют преимущественно с чистой свежей культурой, поскольку примесь посторонней микрофлоры способна вызвать ложную реакцию. На результат также влияют количество бактериальной массы, возраст культуры, температура и соблюдение времени учёта. Отрицательный гиппуратный тест не позволяет абсолютно исключить C. jejuni, так как встречаются атипичные штаммы. При расхождении фенотипических признаков окончательную идентификацию проводят методом MALDI-TOF масс-спектрометрии или молекулярно-генетическими методами.