2) жировосковых веществ (+)
3) углеводов
4) белков
Кислотоустойчивость обусловлена прежде всего особенностями клеточной стенки микобактерий, богатой липидами и восковидными соединениями, главным образом миколовыми кислотами. Эти длинноцепочечные жирные кислоты формируют гидрофобный слой совместно с арабиногалактаном, пептидогликаном и гликолипидами. Такая структура затрудняет проникновение водорастворимых реагентов и препятствует вымыванию основного красителя при обработке кислотой или кислотно-спиртовым раствором.
При окраске по Цилю—Нильсену карболовый фуксин проникает в плотную липидную оболочку, особенно при прогревании, после чего кислотоустойчивые бактерии сохраняют красный цвет. Наиболее характерен этот признак для представителей рода Mycobacterium, включая возбудителей туберкулёза и нетуберкулёзные микобактерии. Частичной кислотоустойчивостью могут обладать Nocardia, поскольку также содержат миколовые кислоты, но их окрашивание обычно слабее и требует более мягкого обесцвечивания.
Таким образом, кислотоустойчивость является фенотипическим проявлением липидно-воскового состава клеточной стенки, а не наличия нуклеиновых кислот, белков или углеводов как таковых. Этот признак используют для первичного обнаружения кислотоустойчивых бактерий в клиническом материале, однако отрицательный результат микроскопии не исключает инфекцию и требует учёта чувствительности метода, качества образца и возможности культуральной или молекулярной диагностики.
| Объект или метод | Особенность окрашивания | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Микобактерии | Выраженная кислотоустойчивость благодаря высокому содержанию миколовых кислот | После обесцвечивания кислотой или кислотным спиртом сохраняют красный цвет карболового фуксина |
| Окраска по Цилю—Нильсену | Карболовый фуксин с прогреванием, затем кислотно-спиртовое обесцвечивание | Кислотоустойчивые бактерии выявляются как красные палочки на синем фоне |
| Модифицированная окраска по Киньону | Используется концентрированный карболовый фуксин без нагревания | Применима для выявления микобактерий при соблюдении этапов фиксации и обесцвечивания |
| Флуорохромная окраска аурамином | Кислотоустойчивые бактерии светятся на тёмном фоне при люминесцентной микроскопии | Более удобна для скрининга больших объёмов материала; подозрительные результаты подтверждают другими методами |
| Nocardia | Слабая или частичная кислотоустойчивость | Окрашиваются при использовании менее концентрированного обесцвечивающего раствора; признак помогает отличить их от большинства неспорообразующих бактерий |
| Обычные неспорообразующие бактерии | Не удерживают карболовый фуксин после кислотного обесцвечивания | Окрашиваются контрастным красителем или выявляются стандартными методами, но не относятся к кислотоустойчивым |
| Отрицательная микроскопия | Отсутствие видимых кислотоустойчивых палочек в исследованном материале | Не исключает микобактериоз; необходимы посев, ПЦР и оценка клинико-рентгенологических данных |
Липидно-восковой барьер одновременно способствует устойчивости микобактерий к высыханию, действию некоторых химических веществ и проникновению ряда антибиотиков. Для лабораторной диагностики важно отличать истинную кислотоустойчивость от артефактов окраски и загрязнения препарата. Интерпретация результата проводится вместе с данными микроскопии, культурального исследования и тестов на видовую идентификацию и лекарственную устойчивость.