2) 25
3) 100 (+)
4) 500
В данной методике РНГА для исследования используют 100 мкл сыворотки. Стандартизированный объем необходим для воспроизводимого приготовления последовательных разведений и соблюдения заданного соотношения исследуемого материала с компонентами диагностической системы. Точное дозирование особенно важно в серологических реакциях, поскольку от него зависят конечное разведение сыворотки, выраженность агглютинации и правильность определения титра антител.
Реакция непрямой гемагглютинации основана на взаимодействии специфических антител сыворотки с менингококковыми антигенами, фиксированными на поверхности эритроцитарного носителя. При наличии соответствующих антител сенсибилизированные эритроциты связываются в пространственную сеть и образуют характерный диффузный слой на дне лунки. При отрицательной реакции эритроциты оседают компактно, формируя четко очерченную пуговку .
Диагностическое значение имеет не только наличие агглютинации, но и ее сохранение в последовательных разведениях сыворотки. Титром считают максимальное разведение, при котором еще определяется достоверная положительная реакция. Для подтверждения острой менингококковой инфекции наиболее информативно исследование парных сывороток с оценкой динамики специфических антител.
| Параметр | Характеристика |
|---|---|
| Исследуемый материал | Сыворотка крови пациента |
| Объем сыворотки по указанной методике | 100 мкл |
| Принцип РНГА | Специфическое связывание антител с антигеном на эритроцитарном носителе |
| Положительная реакция | Диффузная агглютинация сенсибилизированных эритроцитов |
| Отрицательная реакция | Компактное оседание эритроцитов на дне лунки |
| Количественный показатель | Титр антител — наибольшее разведение сыворотки с положительной агглютинацией |
| Наиболее доказательный серологический признак | Значимое нарастание титра специфических антител в парных сыворотках |
РНГА относится к серологическим методам и служит дополнением к прямому выявлению возбудителя или его компонентов. Ее информативность зависит от сроков заболевания, поскольку специфический гуморальный ответ формируется постепенно. Поэтому единичный результат оценивают с учетом клинической картины и периода болезни, а динамическое исследование повышает диагностическую ценность метода. Стандартизация объема исследуемой сыворотки является одним из условий сопоставимости и воспроизводимости результатов.