2) оптимальная температура роста 28℃
3) рост на сложных средах с сорбентами (+)
4) рост при повышенном содержании CO₂
Возбудитель коклюша Bordetella pertussis относится к требовательным к условиям культивирования аэробным грамотрицательным коккобациллам. Для его выделения используют специальные сложные питательные среды, содержащие кровь и адсорбирующие компоненты: классическую картофельно-глицериновую кровяную среду Борде–Жангу или угольно-кровяной агар Ригана–Лоу. Сорбенты, прежде всего активированный уголь, связывают жирные кислоты и другие ингибирующие вещества, которые могут подавлять рост бордетелл.
На таких средах B. pertussis формирует мелкие гладкие блестящие колонии, иногда описываемые как колонии типа капли ртути или жемчужины . Оптимальная температура культивирования составляет 35–37 °C, а не 28 °C; возбудитель нуждается в аэробных условиях и не является анаэробом. Повышенная концентрация углекислого газа не относится к обязательным или определяющим условиям выделения культуры, поэтому диагностически значимой культурной особенностью считается именно рост на специальных средах с сорбентами.
Культуральное исследование наиболее результативно в первые недели заболевания, до начала антибактериальной терапии, при правильном взятии материала с задней стенки носоглотки. Для посева применяют тонкий назофарингеальный тампон, поскольку возбудитель локализуется на мерцательном эпителии дыхательных путей, а не в ротоглоточной слюне.
| Признак | Характеристика при коклюше | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Питательная среда | Среда Борде–Жангу или угольно-кровяной агар Ригана–Лоу | Обеспечивает рост требовательной бордетеллы и снижает действие ингибиторов |
| Сорбирующий компонент | Активированный уголь либо другие адсорбенты | Связывает токсичные для бактерии жирные кислоты и повышает эффективность выделения культуры |
| Температура инкубации | 35–37 °C | Соответствует оптимуму роста; 28 °C не является оптимальной температурой |
| Отношение к кислороду | Аэроб; культивирование проводят при доступе кислорода | Анаэробные условия не являются подходящими для выделения возбудителя |
| Срок появления колоний | Обычно 3–7 суток, иногда требуется более длительная инкубация | Ранний отрицательный результат не всегда исключает инфекцию |
| Морфология колоний | Мелкие, гладкие, блестящие, выпуклые колонии; возможен вид капли ртути | Подлежит подтверждению микроскопическими, биохимическими или молекулярными методами |
| Материал для посева | Мазок или аспират из носоглотки | Забор из ротоглотки снижает чувствительность исследования |
Культуральное выделение B. pertussis является специфичным методом подтверждения коклюша, но его чувствительность зависит от сроков болезни и предшествующей терапии. В современной диагностике посев дополняют ПЦР, особенно при позднем обращении пациента. Обнаружение возбудителя на селективной угольно-кровяной среде должно быть подтверждено видоспецифической идентификацией, поскольку другие виды рода Bordetella также способны расти на подобных средах.