2) Романовскому – Гимзе
3) Цилю – Нильсену (+)
4) Граму
Окраска по Цилю–Нильсену является классическим методом выявления кислотоустойчивых микобактерий, включая Mycobacterium tuberculosis, непосредственно в мазках клинического материала. Кислотоустойчивость обусловлена высоким содержанием липидов, прежде всего миколовых кислот, в клеточной стенке микобактерий. После проникновения карболового фуксина при нагревании краситель прочно фиксируется в клеточной стенке и не удаляется при последующей обработке кислотно-спиртовым раствором.
При микроскопии кислотоустойчивые микобактерии сохраняют красную или малиновую окраску на синем фоне, создаваемом контрастным красителем. Это позволяет быстро обнаруживать кислотоустойчивые бактерии в мокроте и другом патологическом материале. Метод обладает высокой специфичностью в отношении кислотоустойчивых микроорганизмов, однако его аналитическая чувствительность ниже, чем у культуральных и молекулярно-генетических методов, поэтому отрицательный результат микроскопии не исключает туберкулез.
| Метод окраски | Основная диагностическая мишень | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Циля–Нильсена | Кислотоустойчивые бактерии, прежде всего микобактерии | Основной классический способ бактериоскопического выявления кислотоустойчивых микобактерий |
| Флюорохромная окраска аурамином | Кислотоустойчивые микобактерии | Позволяет быстрее просматривать большие площади мазка при люминесцентной микроскопии |
| Грама | Большинство бактерий по особенностям строения клеточной стенки | Для микобактерий малоинформативна из-за богатой липидами клеточной оболочки |
| Нейссера | Метахроматические зерна волютина, характерные, в частности, для коринебактерий | Применяется преимущественно при диагностике дифтерии, а не туберкулеза |
| Романовского–Гимзы | Клеточные элементы крови, простейшие и некоторые внутриклеточные микроорганизмы | Не является стандартным методом обнаружения M. tuberculosis |
| Культуральный метод | Жизнеспособные микобактерии | Более чувствителен и позволяет проводить идентификацию и определение лекарственной чувствительности |
Обнаружение кислотоустойчивых палочек в мазке подтверждает наличие значительного количества микобактерий в исследуемом материале, но само по себе не всегда позволяет окончательно установить их вид. Для верификации комплекса M. tuberculosis применяют культуральные и молекулярно-генетические методы. Последние также позволяют значительно быстрее выявлять генетические маркеры устойчивости к отдельным противотуберкулезным препаратам.