2) подогревают
3) охлаждают
4) встряхивают
Правильный ответ — перемешивают. Перед отбором каждой аликвоты пробу воды аккуратно перемешивают, чтобы восстановить её однородность и обеспечить репрезентативность исследуемой порции. В процессе хранения даже кратковременно могут оседать взвешенные частицы, а микроорганизмы — распределяться неравномерно или адгезировать к частицам; без перемешивания концентрация микробных клеток в разных аликвотах может существенно различаться.
Перемешивание выполняют мягко, без образования пены и аэрозоля, обычно осторожным переворачиванием или плавным вращением закрытого стерильного контейнера в соответствии с методикой исследования. Подогрев и охлаждение не являются этапами подготовки каждой порции: изменение температуры способно повлиять на жизнеспособность и скорость размножения микроорганизмов. Интенсивное встряхивание также не заменяет регламентированное перемешивание, поскольку может привести к аэрации, образованию пузырьков, разбрызгиванию и повышению риска контаминации.
Основной принцип данного требования — получение однородной и статистически представительной пробы при сохранении исходного микробного состава. Особенно важно перемешивание при наличии мутности, взвешенных веществ или осадка, поскольку значительная часть микроорганизмов может быть связана с дисперсными частицами. Каждую последующую порцию отбирают после повторного перемешивания, поскольку после предыдущего отбора распределение компонентов вновь может измениться.
| Приём при подготовке пробы | Основная цель | Влияние на результат | Оценка применимости |
|---|---|---|---|
| Аккуратное перемешивание | Восстановление равномерного распределения микроорганизмов и взвешенных частиц | Повышает репрезентативность каждой аликвоты | Стандартный рекомендуемый приём перед каждым отбором |
| Интенсивное встряхивание | Быстрое перемешивание содержимого | Может вызвать аэрацию, пену, аэрозолеобразование и риск контаминации | Не применяется вместо мягкого перемешивания, если не предусмотрено методикой |
| Отстаивание | Разделение жидкой фазы и осадка | Приводит к неравномерному распределению микроорганизмов и занижению или завышению показателей | Недопустимо перед отбором репрезентативной порции |
| Подогрев | Изменение температуры образца | Может изменить жизнеспособность и скорость размножения микроорганизмов | Не используется для стандартного перемешивания пробы |
| Охлаждение | Временное сохранение образца при транспортировке | Замедляет метаболические процессы, но не обеспечивает однородности без последующего перемешивания | Допустимо только в рамках условий хранения, установленных методикой |
| Отбор без предварительного перемешивания | Технически упрощает работу | Повышает вариабельность результатов и снижает сопоставимость аликвот | Не соответствует принципу репрезентативного отбора |
Перемешивание не должно приводить к изменению температуры, объёма или стерильности образца. Контейнер сохраняют закрытым, а манипуляции выполняют с соблюдением асептики. Если методика конкретного исследования содержит специальные указания по ресуспендированию осадка или способу гомогенизации, они имеют приоритет. Полученная после перемешивания аликвота должна быть немедленно направлена на соответствующий этап анализа.