2) морфологии
3) физиологии (+)
4) патогенности
Выбор питательной среды определяется прежде всего физиологическими и метаболическими особенностями микроорганизма: потребностью в источниках углерода и азота, витаминах, аминокислотах, факторах роста, кислороде, определённой кислотности и осмолярности. Для размножения бактерия должна получать субстраты, которые она способна транспортировать через клеточную мембрану и включать в энергетический и пластический обмен. Поэтому состав среды должен соответствовать ферментативным возможностям исследуемого вида.
Неприхотливые бактерии растут на простых универсальных средах, тогда как требовательным микроорганизмам необходимы кровь, сыворотка или специальные ростовые добавки. Физиологические различия используются также при создании селективных и дифференциально-диагностических сред: ингибирующие вещества подавляют сопутствующую микрофлору, а определённые субстраты и индикаторы выявляют ферментативную активность бактерий. Морфология, антигенная структура и патогенность важны для последующей идентификации и оценки клинического значения культуры, но сами по себе не определяют её пищевые и физико-химические потребности.
| Тип среды | Физиологический принцип выбора | Пример | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Простая универсальная | Обеспечивает базовые потребности неприхотливых бактерий в питательных веществах | Мясо-пептонный агар | Получение роста большинства сапрофитных и ряда условно-патогенных бактерий |
| Обогащённая | Содержит дополнительные факторы роста, необходимые требовательным микроорганизмам | Кровяной или шоколадный агар | Культивирование стрептококков, нейссерий, гемофильных бактерий |
| Элективная | Создаёт оптимальные условия для преимущественного размножения определённого вида | Щелочная пептонная вода | Накопление холерных вибрионов |
| Селективная | Содержит вещества, подавляющие сопутствующую микрофлору | Желточно-солевой агар | Выделение стафилококков благодаря устойчивости к высокой концентрации натрия хлорида |
| Дифференциально-диагностическая | Выявляет способность бактерий расщеплять определённый субстрат | Среда Эндо | Различение лактозоположительных и лактозоотрицательных энтеробактерий |
| Для анаэробов | Создаёт пониженный окислительно-восстановительный потенциал и защищает от кислорода | Среда Китта–Тароцци | Выделение и накопление облигатно-анаэробных бактерий |
Условия инкубации являются продолжением физиологически обоснованного выбора среды. Учитывают температуру, газовый состав атмосферы, продолжительность культивирования и оптимальный диапазон pH. Несоответствие хотя бы одного из этих параметров может привести к отсутствию роста даже при наличии жизнеспособного возбудителя. Следовательно, знание физиологии бактерий обеспечивает как успешное выделение чистой культуры, так и её последующую биохимическую идентификацию.