2) на лецитиназную активность
3) гемолиза эритроцитов
4) на каталазу (+)
Выделение чёрных колоний на средах для выявления сульфитредуцирующих микроорганизмов является ориентировочным признаком: потемнение обусловлено образованием сульфида железа при восстановлении сульфитов. Для подтверждения принадлежности изолята к роду Clostridium используют каталазную пробу. У большинства клостридий каталаза отсутствует, поэтому после нанесения культуры на перекись водорода не наблюдается характерного выделения пузырьков кислорода.
Каталаза расщепляет перекись водорода на воду и молекулярный кислород; появление пузырьков указывает на положительную реакцию. Отрицательная каталазная проба в сочетании с анаэробным ростом, грамположительными палочками и образованием эндоспор поддерживает идентификацию клостридий. В данном задании знаком + обозначен выбор метода исследования, а не положительный результат каталазной реакции.
Другие перечисленные признаки имеют преимущественно видовую или дифференциальную ценность. Лецитиназная активность и характерный гемолиз особенно важны при подтверждении Clostridium perfringens, но не являются универсальными признаками всего рода. Свёртывание молока по Минкевичу также оценивает определённые биохимические свойства и не заменяет родовую идентификацию.
| Признак | Клостридии | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Каталазная реакция | Обычно отрицательная | Поддерживает принадлежность к роду Clostridium при отсутствии пузырьков кислорода |
| Отношение к кислороду | Преимущественно строгие анаэробы | Рост в анаэробных условиях является важным подтверждающим признаком |
| Морфология | Грамположительные палочки, часто со спорами | Спорообразование помогает отличить клостридии от неспорообразующих анаэробов |
| Сульфитредукция | Восстановление сульфитов с образованием чёрного осадка сульфида железа | Скрининговый признак сульфитредуцирующих клостридий, но не окончательная идентификация |
| Лецитиназная активность | Выражена не у всех видов; характерна для ряда штаммов C. perfringens | Используется главным образом для видовой дифференциации |
| Гемолиз | Вариабельный, у C. perfringens возможна двойная зона гемолиза | Позволяет уточнить видовую принадлежность, но не подтверждает весь род |
Каталазная проба должна проводиться из чистой культуры, полученной после выделения подозрительных колоний. Отрицательный результат оценивают не изолированно, а вместе с анаэробным характером роста, морфологией и спорообразованием. При необходимости окончательную идентификацию подтверждают биохимическими панелями или методами MALDI-TOF MS и молекулярной диагностики.