2) 333
3) 300 (+)
4) 100
Правильный объем исследуемой воды для качественного выявления общих колиформных бактерий (ОКБ) в данной методике составляет 300 мл. Такой объем используют при мембранно-фильтрационном исследовании: воду пропускают через стерильную мембрану, задерживающую бактериальные клетки, после чего фильтр переносят на селективно-дифференциальную питательную среду. Концентрирование микроорганизмов из относительно большого объема повышает вероятность обнаружения ОКБ при их низкой концентрации.
К ОКБ относят грамотрицательные неспорообразующие палочки семейства Enterobacterales, способные ферментировать лактозу с образованием кислоты и, как правило, газа при заданной температуре инкубации. На средах типа Эндо или хромогенных средах подозрительные колонии выявляют по характерному окрашиванию и ферментативным признакам, затем при необходимости подтверждают биохимическими тестами. В качественном анализе оценивают наличие или отсутствие ОКБ в установленном объеме воды, а не рассчитывают их число в колониеобразующих единицах.
Объем 300 мл является нормативно заданным аналитическим объемом для рассматриваемого варианта качественного поиска. Использование меньшего объема снижает чувствительность исследования и увеличивает риск ложноотрицательного результата при эпизодическом или слабом фекальном загрязнении. Превышение объема без изменения методики может привести к перегрузке мембраны посторонней микрофлорой и затруднить интерпретацию роста.
| Этап или критерий | Характеристика |
|---|---|
| Исследуемая группа | Общие колиформные бактерии — санитарно-показательные микроорганизмы, свидетельствующие о возможном загрязнении воды. |
| Объем при качественном поиске | 300 мл воды; объем установлен методикой и обеспечивает необходимую вероятность обнаружения низкой обсемененности. |
| Принцип метода | Мембранная фильтрация с концентрированием клеток на поверхности фильтра и последующим культивированием. |
| Первичная питательная среда | Среда Эндо или хромогенная селективно-дифференциальная среда для выявления лактозоположительных колоний. |
| Предварительный признак ОКБ | Рост типичных колоний с признаками ферментации лактозы; конкретный цвет и морфология зависят от применяемой среды. |
| Подтверждающие признаки | Грамотрицательные палочки, оксидазоотрицательная реакция, ферментация углеводов и соответствующий биохимический профиль. |
| Форма выдачи результата | Обнаружены или не обнаружены в исследованном объеме; количественная оценка требует отдельной методики подсчета. |
При выполнении анализа необходимо соблюдать стерильность отбора, транспортировки и фильтрации образца. Мембраны, питательные среды и оборудование подлежат контролю качества, включая отрицательные и положительные контроли. Интерпретацию проводят с учетом действующего нормативного документа, поскольку аналитический объем и режим инкубации зависят от конкретной утвержденной методики. Обнаружение ОКБ требует оценки безопасности воды и, как правило, проведения дополнительных исследований на термотолерантные колиформные бактерии и Escherichia coli.