2) 0,1 см3 из одного разведения
3) 0,1 см3 из каждого разведения
4) 1 см3 из каждого разведения (+)
При определении КМАФАнМ в молочных продуктах применяют глубинный посев: по 1 см3 исследуемой суспензии вносят в стерильную чашку Петри, после чего заливают расплавленной питательной средой и тщательно перемешивают. Такой объем является стандартным для глубинного метода и обеспечивает равномерное распределение микроорганизмов во всем объеме агара. Посев 0,1 см3 характерен преимущественно для поверхностного метода, поэтому для глубинного варианта он методически неоправдан.
Материал засевают из каждого приготовленного десятикратного разведения, поскольку исходная обсемененность продукта заранее неизвестна. Это позволяет получить чашки с различным числом колоний и выбрать для подсчета те, на которых колонии располагаются раздельно и находятся в нормативном счетном диапазоне. КМАФАнМ выражают в КОЕ/г или КОЕ/см3, пересчитывая результат с учетом количества колоний, объема посева и коэффициента соответствующего разведения.
| Элемент методики | Характеристика |
|---|---|
| Исследуемый показатель | КМАФАнМ — суммарное количество мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов, растущих на используемой питательной среде при регламентированных условиях. |
| Подготовка образца | Готовят исходное разведение продукта и серию последовательных десятикратных разведений в стерильном разбавителе. |
| Объем при глубинном посеве | 1 см3 соответствующего разведения; суспензию смешивают с расплавленной и охлажденной до рабочей температуры питательной средой. |
| Причина посева нескольких разведений | Получение чашек с различной плотностью роста и выбор варианта, пригодного для достоверного подсчета колоний. |
| Отличие поверхностного метода | На поверхность уже застывшей среды обычно наносят меньший объем, чаще 0,1 см3; микроорганизмы растут преимущественно на поверхности агара. |
| Результат исследования | Число колониеобразующих единиц пересчитывают на единицу массы или объема продукта с учетом разведения и объема внесенного материала. |
| Практическое значение | Показатель характеризует общую микробную обсемененность и санитарное состояние продукта, но не заменяет видовую идентификацию отдельных патогенов. |
Глубинный посев особенно удобен для молочных продуктов, поскольку позволяет исследовать стандартный миллилитровый объем и выявлять микроорганизмы, способные расти не только на поверхности, но и внутри агара. При оценке чашек учитывают отсутствие слияния колоний и соответствие их количества принятому диапазону подсчета. При слишком высокой обсемененности используют более концентрированное разведение, а при малом числе колоний — менее разведенный материал. Итоговый показатель сопоставляют с нормативами, установленными для конкретного вида молочного продукта.