2) после наивысшего разведения с тремя положительными пробирками было посеяно лишь одно большее разведение, в котором оказались положительными одна или две пробирки (+)
3) три десятикратных разведения были более низкими или более высокими по сравнению с приведенными табличными значениями
4) все пробирки посеянных разведений окажутся отрицательными
НВЧ (наиболее вероятное число, MPN) — это статистическая оценка содержания микроорганизмов, основанная на соотношении положительных и отрицательных пробирок после посева последовательных разведений. Положительной считают пробирку, в которой выявлен предусмотренный методикой признак роста или метаболической активности целевого микроорганизма. Расчёт опирается на пуассоновскую модель распределения клеток: при увеличении разведения доля положительных пробирок обычно уменьшается.
Отмеченный вариант верен, поскольку после последнего разведения, где положительными были все три пробирки, следующее, более высокое разведение также не стало полностью отрицательным. Если после него была выполнена только одна ступень посева и в ней обнаружены одна или две положительные пробирки, полноценная трёхступенчатая комбинация для обращения к таблице НВЧ не сформирована. Конечная точка определения не установлена, поэтому результат выражают односторонне — более чем соответствующее табличное значение; для получения точной оценки необходимо продолжить ряд разведений.
Такая запись означает не отсутствие возможности обнаружения, а превышение верхней границы применённого диапазона количественного определения. Напротив, преимущественно отрицательные или полностью отрицательные пробирки обычно указывают на низкое содержание микроорганизмов, находящееся около нижнего предела обнаружения метода. При интерпретации учитывают объём посева, массу или объём исследованного продукта, кратность разведений и нормативные требования к конкретной группе микроорганизмов.
| Сочетание результатов в последовательных разведениях | Диагностическая интерпретация | Оформление результата |
|---|---|---|
| 3–3–1 или 3–3–2 при наличии трёх последовательных разведений | Есть переход от сплошной положительности к частичной; комбинация соответствует табличному диапазону | Указывают конкретное табличное значение НВЧ |
| 3–3–0 | В последнем из трёх разведений все пробирки отрицательны; конечная точка находится в пределах метода | Рассчитывают НВЧ по соответствующей таблице |
| 3–3–3 в трёх выбранных разведениях | Целевой микроорганизм сохраняется во всех пробирках даже при максимальном исследованном разведении | Более чем верхнее табличное значение; требуется дальнейшее разведение |
| После последнего разведения с 3 положительными пробирками выполнено только одно большее разведение, в котором положительны 1–2 пробирки | Конечная точка и полный трёхступенчатый профиль не установлены; результат выходит за надёжный табличный диапазон | Записывают более чем соответствующее значение |
| Все пробирки во всех исследованных разведениях отрицательны | Концентрация ниже чувствительности данной схемы или находится ниже нижней границы расчётной таблицы | Обычно менее чем или не обнаружено с указанием предела метода |
| Ни в одном разведении нет трёх положительных пробирок | Само по себе это не является признаком превышения; оценка зависит от всей комбинации результатов и диапазона разведений | Используют подходящую строку таблицы либо повторяют исследование |
| Немонотонный профиль, например 1–0–1 | Возможны случайные статистические колебания, ошибка посева или контаминация | Проверяют соблюдение методики и при необходимости повторяют анализ |
При получении результата более чем санитарное заключение нельзя основывать на максимальном табличном числе как на точной концентрации. Исследование повторяют с включением более высоких разведений и соблюдением установленного числа пробирок на каждой ступени. Итоговый показатель оформляют в НВЧ на грамм или миллилитр продукта с обязательным указанием схемы посева и предела количественного определения. Только после этого результат корректно сопоставляют с нормативом для соответствующего пищевого продукта.