2) формалинизированные эритроциты барана, сенсибилизированные антигенами из сальмонелл
3) сыворотки диагностические сальмонеллёзные неадсорбированные к каждой из отдельных серогрупп (A, B, C1, C2, D, E) (+)
4) акролеинизированные куриные эритроциты, сенсибилизированные Vi-антигеном S.enterica
Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) при серологическом выявлении антител к О-антигенам основана на взаимодействии антител сыворотки с соматическими антигенами Salmonella, фиксированными на эритроцитах. При наличии специфических антител происходит связывание и пространственное мостиковое соединение эритроцитов, что проявляется их равномерной агглютинацией; при отрицательной реакции эритроциты оседают компактным ใน осадком.
Положительный контроль должен содержать заранее известные антитела к соответствующему антигену. Поэтому используют диагностические сальмонеллёзные сыворотки, неадсорбированные к отдельным серогруппам A, B, C1, C2, D и E. Они подтверждают сохранность антигенных свойств эритроцитарного диагностикума и правильность постановки реакции, обеспечивая ожидаемую агглютинацию с О-антигеном соответствующей серогруппы.
Эритроцитарные диагностикумы, включая комплексные и сенсибилизированные антигенами Salmonella эритроциты, являются реагентами, несущими антиген, а не положительными контрольными сыворотками. Vi-антиген относится к капсульным антигенам и не является О-антигеном, поэтому анти-Vi-реагент не контролирует выявление антител к соматическим антигенам. Таким образом, правильный вариант основан на принципе соответствия: при обнаружении антител положительным контролем служит сыворотка с известной специфической антительной активностью.
| Компонент или признак | Иммунологическая характеристика | Роль в РПГА | Интерпретация |
|---|---|---|---|
| О-антиген Salmonella | Соматический термостабильный липополисахаридный антиген клеточной стенки | Фиксируется на эритроцитах диагностикума | Определяет серогрупповую специфичность реакции |
| Серогруппы A, B, C1, C2, D, E | Группируются преимущественно по антигенной структуре О-комплекса | Используются для подбора соответствующей контрольной сыворотки | Реакция должна быть выражена с гомологичным антигеном |
| Неадсорбированная диагностическая сальмонеллёзная сыворотка | Содержит известные антитела к О-антигенам данной серогруппы | Положительный контроль постановки | Должна вызывать ожидаемую гемагглютинацию |
| Эритроцитарный сальмонеллёзный диагностикум | Эритроциты, сенсибилизированные антигенами Salmonella | Основной индикаторный реагент для исследования сыворотки пациента | Не заменяет положительный сывороточный контроль |
| Формалинизированные эритроциты, сенсибилизированные антигеном | Носитель антигена, фиксированный для сохранения стабильности реагента | Может входить в состав диагностической системы | Относится к антигенной, а не контрольной части реакции |
| Vi-антиген | Капсульный антиген, отличный от соматического О-антигена | Используется для выявления анти-Vi-антител | Не контролирует реакцию на О-антигены |
| Контроль валидности реакции | Сопоставление положительного и отрицательного контролей | Позволяет исключить неспецифическую агглютинацию и дефекты реагентов | Результаты образцов оценивают только при корректных контрольных реакциях |
В каждой серии РПГА необходимо контролировать как положительную, так и отрицательную реакции. Титр антител определяют по максимальному разведению сыворотки, сохраняющему достоверную гемагглютинацию, с учётом установленного диагностического порога. Однократное выявление антител следует оценивать осторожно, поскольку возможны анамнестические и перекрёстные реакции. Более убедительным серологическим признаком текущего процесса является диагностически значимое нарастание титра в парных сыворотках.