2) крупного рогатого скота
3) человека
4) кролика (+)
Для определения коагулазы наиболее целесообразно применять плазму кролика, поскольку она содержит активный коагулазореактивный фактор, с которым взаимодействует стафилококковая коагулаза. Образующийся комплекс приобретает тромбинаподобную активность и превращает фибриноген в фибрин, что проявляется образованием видимого сгустка. Плазма обычно используется в цитратной форме, чтобы предотвратить свертывание до внесения исследуемой культуры.
Коагулазоположительная реакция является важным признаком, прежде всего, Staphylococcus aureus. В пробирочном тесте после инкубации при 35–37 °C оценивают наличие плотного сгустка, сохраняющегося при осторожном наклоне пробирки. Плазма кролика обеспечивает более высокую чувствительность и воспроизводимость реакции по сравнению с плазмой человека и рядом других видов животных, поэтому считается стандартной для данного исследования.
Следует учитывать две формы фермента: связанную коагулазу, или clumping factor, выявляемую в реакции на стекле, и свободную коагулазу, определяемую преимущественно пробирочным методом. Результат оценивают с учетом контроля плазмы и чистоты культуры, поскольку аутоагглютинация и смешанная микрофлора могут приводить к ошибочной интерпретации.
| Параметр | Характеристика |
|---|---|
| Предпочтительный субстрат | Цитратная плазма кролика; обеспечивает оптимальную чувствительность реакции на коагулазу. |
| Механизм реакции | Свободная коагулаза образует комплекс с коагулазореактивным фактором плазмы и вызывает превращение фибриногена в фибрин. |
| Пробирочный тест | Выявляет преимущественно свободную коагулазу; положительный результат — образование устойчивого сгустка после инкубации. |
| Тест на стекле | Выявляет связанную коагулазу, или clumping factor; положительная реакция проявляется быстрым склеиванием клеток стафилококка. |
| Плазма человека | Может использоваться в отдельных методиках, но обычно менее стандартизована и не является предпочтительным материалом для рутинной постановки теста. |
| Диагностическое значение | Коагулазоположительная реакция поддерживает идентификацию S. aureus, однако окончательное заключение требует учета морфологии, биохимических свойств и результатов видовой идентификации. |
| Контроль достоверности | Необходимы положительный и отрицательный контроли, а также проверка отсутствия аутоагглютинации и посторонней микрофлоры. |
Выбор плазмы кролика основан не на видовой принадлежности стафилококка, а на свойствах плазменного коагулазореактивного фактора и надежности получаемой реакции. Отрицательный результат при тесте на стекле не исключает наличие свободной коагулазы, поэтому при подозрении на S. aureus проводят пробирочный вариант. При сомнительном или слабоположительном результате исследование повторяют из чистой культуры с обязательными контролями.