2) индолообразования
3) кислотообразования из глюкозы (+)
4) образования ацетилметилкарбинола
Реакция с метиловым красным (MR-тест) выявляет способность микроорганизма интенсивно ферментировать глюкозу с образованием устойчивых кислых продуктов. При смешаннокислом брожении накапливаются молочная, уксусная, муравьиная и янтарная кислоты, вследствие чего pH питательной среды снижается до 4,4 и ниже. После добавления индикатора метилового красного среда приобретает красную окраску, что расценивается как положительная реакция.
Таким образом, тест оценивает выраженность и стабильность кислотообразования из глюкозы, а не наличие отдельного фермента. Для достоверной интерпретации учитывают интенсивность окраски: красный цвет указывает на значительное подкисление, оранжевый является пограничным, а желтый — на отсутствие устойчивого кислотообразования. MR-тест входит в комплекс биохимической идентификации энтеробактерий и особенно информативен в сочетании с реакцией Фогеса—Проскауэра.
| Исследуемый признак | Метод или реакция | Механизм | Положительный результат | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|---|
| Устойчивое кислотообразование из глюкозы | Метиловый красный, MR | Смешаннокислое брожение с накоплением органических кислот | Красная окраска среды, pH обычно ≤ 4,4 | Характерно для микроорганизмов с выраженным смешаннокислым типом метаболизма |
| Образование нейтрального конечного продукта | Фогес—Проскауэр, VP | Синтез ацетоина с последующим образованием 2,3-бутандиола | Розово-красное окрашивание после добавления реактивов | Выявляет иной путь утилизации глюкозы; часто обратно коррелирует с MR |
| Образование индола | Индольная реакция | Расщепление триптофана ферментом триптофаназой | Красное кольцо после добавления реактива Ковача или Эрлиха | Не характеризует интенсивность кислотообразования |
| Оксидазная активность | Оксидазный тест | Выявление цитохром-c-оксидазы дыхательной цепи | Фиолетовое окрашивание реактива в течение короткого времени | Используется для дифференциации, например, энтеробактерий и неферментирующих грамотрицательных бактерий |
| Промежуточное подкисление среды | MR с оранжевым оттенком | Недостаточное или нестойкое накопление кислых метаболитов | Оранжевая окраска, пограничная зона pH | Требует осторожной оценки и соблюдения времени инкубации |
| Отсутствие выраженного кислотообразования | MR с желтым оттенком | pH остается выше зоны перехода индикатора | Желтая окраска среды | Реакция считается отрицательной |
Результат MR-теста зависит от состава среды, продолжительности инкубации и плотности исследуемой культуры, поэтому реакцию проводят по стандартизованной методике. Наиболее корректно интерпретировать ее вместе с VP-тестом, поскольку оба исследования оценивают варианты метаболизма глюкозы. Положительная MR-реакция свидетельствует о преобладании смешаннокислого брожения и устойчивом снижении pH среды. Оксидазный тест, индольная реакция и выявление ацетоина определяют другие биохимические свойства и не заменяют оценку кислотообразования.