2) мочевину
3) щавелевую кислоту
4) пирофосфат железа
Правильным является раствор фенолфталеинового соединения натрия, обычно используемый в виде фенолфталеинфосфата натрия. Сибиреязвенная палочка Bacillus anthracis обладает выраженной фосфатазной активностью: при гидролизе субстрата высвобождается фенолфталеин, который в щелочной среде окрашивается в розово-красный цвет. Поэтому компонент выполняет дифференциально-диагностическую функцию и помогает выявлять колонии возбудителя среди сопутствующей микрофлоры.
Селективность такой среды определяется совокупностью ее физико-химических свойств и, в специализированных вариантах, добавлением ингибирующих компонентов, ограничивающих рост посторонних микроорганизмов. Фенолфталеиновый субстрат не следует рассматривать как единственный селективный фактор: его основная роль — индикация характерной ферментативной активности B. anthracis. Полученный признак является ориентировочным и требует подтверждения комплексом методов — исследованием морфологии колоний, окраской по Граму, проверкой неподвижности, выявлением капсулы, постановкой ПЦР или использованием специфического бактериофага.
Для возбудителя сибирской язвы типичны крупные грамположительные спорообразующие палочки, обычно неподвижные и образующие на кровяном агаре серовато-белые шероховатые колонии с феноменом головы Медузы . В отличие от Bacillus cereus, сибиреязвенная палочка, как правило, не гемолизирует эритроциты и обладает капсулой в тканях или на соответствующих питательных средах. Совокупность культуральных и биохимических признаков важнее изолированного изменения окраски среды.
| Признак | Bacillus anthracis | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Фенолфталеинфосфатазная активность | Обычно выражена; после расщепления субстрата появляется розово-красная окраска в щелочной среде | Ориентировочный дифференциальный признак на специальной среде |
| Морфология | Крупные грамположительные палочки, располагающиеся цепочками; споры обычно центральные или субтерминальные | Подтверждает принадлежность к роду Bacillus |
| Подвижность | Неподвижен | Помогает отличить от большинства штаммов B. cereus и других близких бацилл |
| Гемолиз на кровяном агаре | Как правило, отсутствует или выражен минимально | Отличительный признак при сравнении с гемолитическими бациллами |
| Капсулообразование | Характерно в организме хозяина и на средах с повышенным содержанием углекислоты | Важный признак вирулентного сибиреязвенного штамма |
| Подтверждающие методы | ПЦР генов капсулы и токсиновых факторов, специфический фаг, иммунологические методы | Необходимы для окончательной идентификации и исключения близкородственных бацилл |
Раствор фенолфталеинфосфата натрия ценен тем, что выявляет фосфатазную активность возбудителя по характерному изменению окраски. Результат посева оценивают только в комплексе с микроскопическими и культуральными признаками. При подозрении на сибирскую язву работу проводят в специализированной лаборатории с соблюдением требований биологической безопасности. Выделение культуры и подтверждение ее видовой принадлежности имеют принципиальное значение для эпидемиологического расследования и выбора противоэпидемических мероприятий.