2) среда Джорданса
3) молоко с метиленовым синим 0,1%
4) среда Хью – Лейфсон
Лакмусовое молоко по Тукаеву используют для выявления характерной для Clostridium perfringens бурной (штормовой ) ферментации молока. При анаэробном росте микроорганизм быстро ферментирует лактозу с образованием органических кислот и большого количества газа. Закисление вызывает изменение окраски лакмуса, а газообразование приводит к разрыву и вспучиванию казеинового сгустка: свернувшееся молоко как бы вскипает , распадается на фрагменты и выталкивается вверх.
Положительная реакция обычно развивается быстро и сочетает несколько признаков: изменение цвета индикатора, образование плотного или рыхлого сгустка, его разрушение пузырьками газа и нередко последующее просветление среды вследствие протеолиза. Именно совокупность бурной ферментации и разрушения казеинового сгустка, а не одно лишь изменение pH, считается феноменом штормовой реакции.
Другие перечисленные среды предназначены для оценки иных свойств бактерий. Среда Хью—Лейфсона позволяет определить окислительный или ферментативный тип утилизации углевода, молоко с метиленовым синим — восстановительную активность, тогда как среда Джорданса применяется в других дифференциально-биохимических схемах. Штормовая реакция имеет ориентировочное значение и должна подтверждаться анаэробным культивированием, морфологией колоний и специфическими тестами, включая выявление лецитиназной активности.
| Признак или среда | Что оценивается | Характерный результат | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Лакмусовое молоко по Тукаеву | Ферментация лактозы и воздействие продуктов метаболизма на казеин | Закисление, изменение цвета лакмуса, образование и разрушение сгустка с выделением газа | Классический способ выявления штормовой реакции C. perfringens |
| Механизм штормовой реакции | Сочетанное образование кислот и газа при сахаролитическом обмене | Вскипание молока, вспучивание и фрагментация казеинового сгустка | Отличительный фенотип быстро ферментирующих клостридий, прежде всего C. perfringens |
| Лакмусовый индикатор | Изменение кислотно-основного состояния среды | Смещение окраски в кислую область | Дополнительный компонент реакции; сам по себе не подтверждает вид |
| Среда Хью—Лейфсона | Окислительный или ферментативный тип метаболизма углевода | Изменение pH в инокулированной и/или закрытой от кислорода части среды | Не является средой для оценки разрушения молочного сгустка |
| Молоко с метиленовым синим | Восстановительная активность культуры и потребление кислорода | Обесцвечивание индикатора при восстановлении | Не отражает специфическую штормовую ферментацию |
| Дополнительная идентификация C. perfringens | Лецитиназная и другие видоспецифичные биохимические свойства | Помутнение среды с лецитином, характерные реакции на кровяном агаре и другие подтверждающие признаки | Необходима для окончательной видовой идентификации |
Штормовая реакция формируется преимущественно при строгом соблюдении анаэробных условий и правильной температуре инкубации. Отсутствие реакции не исключает C. perfringens, особенно при низкой концентрации инокулюма или нарушении условий культивирования. Окончательное заключение основывают на совокупности культуральных, биохимических и, при необходимости, молекулярных результатов.