2) идентификация бактерий
3) получение изолированных колоний
4) накопление чистой культуры (+)
Перенос изолированной колонии на поверхность скошенного агара предназначен для накопления достаточного количества биомассы чистой культуры. Изолированная колония обычно происходит от одной жизнеспособной бактериальной клетки или небольшого клона клеток, поэтому её пересев на питательную среду позволяет получить культуру одного таксономического типа в объёме, необходимом для дальнейших исследований.
Скошенная поверхность агара увеличивает площадь роста и обеспечивает удобное культивирование, кратковременное хранение и последующий отбор материала. Такой посев не является методом первичного разобщения бактерий: эта задача решается штриховым посевом или использованием других методов выделения колоний. Идентификацию проводят после получения чистой культуры по морфологическим, культуральным, биохимическим, серологическим или молекулярно-генетическим признакам; при необходимости одновременно контролируют отсутствие посторонней микрофлоры.
| Этап исследования | Исходный материал | Основная цель | Ожидаемый результат |
|---|---|---|---|
| Первичный посев клинического материала | Исследуемый образец, содержащий смешанную микрофлору | Выделение отдельных популяций микроорганизмов | Рост различных типов колоний |
| Разобщение посевом | Материал первичного посева | Механическое разделение клеток на поверхности плотной среды | Формирование изолированных колоний |
| Отбор изолированной колонии | Одна колония с однородными признаками | Получение исходного инокулюма предположительно одного штамма | Материал для пересева на питательную среду |
| Посев на скошенный агар | Материал из изолированной колонии | Наращивание биомассы чистой культуры | Достаточное количество клеток одного штамма |
| Контроль чистоты культуры | Рост на скошенном агаре | Исключение контаминации посторонними микроорганизмами | Однородный рост и соответствие микроскопической картины |
| Идентификация и определение чувствительности | Накопленная чистая культура | Установление вида и оценка антибиотикочувствительности | Видовая идентификация и профиль чувствительности штамма |
Таким образом, скошенный агар используется как среда для поддержания и размножения уже выделенного микроорганизма, а не для первоначального разделения смешанной популяции. Чистота культуры имеет принципиальное значение, поскольку примесь другого вида может привести к ошибочной идентификации и недостоверной антибиотикограмме. Полученная биомасса также может применяться для постановки биохимических, серологических и молекулярных тестов.