2) микроскопического исследования соскоба кожи для выявления возбудителя заболевания
3) анализа на ДНК вируса простого герпеса 1 и 2 типов методом ПЦР в крови
4) патолого-анатомического исследования биопсийного материала кожи с применением иммунофлюоресцентных методов (+)
Дифференциальная диагностика герпетиформного дерматита Дюринга и буллёзного пемфигоида основывается на сочетании гистологического исследования и прямой иммунофлюоресценции. Для исследования предпочтительно брать два образца: биоптат свежего пузыря для окраски гематоксилином и эозином и участок внешне неизменённой кожи рядом с высыпанием для прямой иммунофлюоресценции. Оба заболевания относятся к субэпидермальным буллёзным дерматозам, однако имеют различный иммунопатогенез и характер отложения иммунных комплексов.
При герпетиформном дерматите выявляются субэпидермальные пузырьки с преимущественно нейтрофильной инфильтрацией в сосочках дермы, а при прямой иммунофлюоресценции — гранулярные отложения IgA в области верхушек сосочков дермы и вдоль дермоэпидермального соединения. Для буллёзного пемфигоида характерны субэпидермальный пузырь с преобладанием эозинофилов и линейное отложение IgG и компонента комплемента C3 по базальной мембране. Именно такой иммуноморфологический паттерн позволяет надёжно различить заболевания.
Цитологическое выявление акантолитических клеток имеет диагностическое значение прежде всего при пузырчатке, которая является внутриэпидермальным акантолитическим дерматозом. Соскоб кожи для обнаружения возбудителя не используется, поскольку оба заболевания не имеют инфекционной природы, а ПЦР на вирус простого герпеса в крови не подтверждает ни один из этих диагнозов.
| Признак | Герпетиформный дерматит Дюринга | Буллёзный пемфигоид |
|---|---|---|
| Тип пузыря | Субэпидермальный | Субэпидермальный |
| Клеточный состав инфильтрата | Нейтрофилы, особенно в сосочках дермы | Эозинофилы, нередко с эозинофильной спонгиозой |
| Прямая иммунофлюоресценция | Гранулярные отложения IgA в сосочках дермы и по дермоэпидермальному соединению | Линейные отложения IgG и C3 вдоль базальной мембраны |
| Основные мишени аутоантител | Эпидермальная трансглутаминаза; связь с глютен-чувствительной энтеропатией | Белки гемидесмосом BP180 и BP230 |
| Типичная клиническая картина | Сгруппированные интенсивно зудящие везикулы и папуловезикулы, чаще на разгибательных поверхностях | Напряжённые пузыри на эритематозной или уртикарной коже, обычно у пациентов пожилого возраста |
| Дополнительные методы | Определение антител к тканевой и эпидермальной трансглутаминазе, оценка целиакии | Непрямая иммунофлюоресценция на солевом расщеплении кожи, ИФА на антитела к BP180/BP230 |
Для получения достоверного результата важно соблюдать технику биопсии: материал для прямой иммунофлюоресценции берут из перилезионной, клинически неповреждённой кожи, поскольку в центре эрозии иммунные депозиты могут разрушаться. Отрицательный результат не исключает заболевание при неправильном выборе участка или транспортировке образца. Морфологическое исследование без иммунофлюоресценции может установить субэпидермальный уровень расслоения, но не всегда позволяет определить конкретную нозологию.