2) химерный ген EWSR1-FLI1 (+)
3) экспрессия гена РНOX2B
4) химерный ген NTRK3-ETV6
Для саркомы Юинга характерна реципрокная транслокация t(11;22)(q24;q12), в результате которой образуется химерный ген EWSR1::FLI1. Белок-химерный транскрипционный фактор изменяет экспрессию генов, регулирующих пролиферацию и дифференцировку клеток. Такая перестройка выявляется примерно у 85% опухолей Юинга и обладает высокой диагностической специфичностью, поэтому обнаружение EWSR1-FLI1 методом FISH, ОТ-ПЦР или секвенирования нового поколения подтверждает принадлежность опухоли к семейству саркомы Юинга при соответствующей морфологической картине.
Мелкоклеточная остеосаркома может иметь сходное с саркомой Юинга строение из мелких круглых клеток, однако ее принципиальным признаком является продукция опухолевого остеоида, а перестройка EWSR1-FLI1 отсутствует. Экспрессия CD99 и NKX2.2 поддерживает диагноз саркомы Юинга, но не является абсолютно специфичной; поэтому при малоклеточной опухоли кости необходима комплексная оценка морфологии, иммунного профиля и молекулярно-генетических данных.
Остальные указанные маркеры относятся преимущественно к опухолям другой линии дифференцировки. Амплификация MYCN и экспрессия PHOX2B характерны прежде всего для нейробластомы, тогда как слияние ETV6-NTRK3 связано с инфантильной фибросаркомой и рядом других NTRK-ассоциированных опухолей. Следовательно, диагностически значимым маркером в данной дифференциальной диагностике является именно EWSR1-FLI1.
| Признак | Саркома Юинга | Мелкоклеточная остеосаркома |
|---|---|---|
| Ключевая молекулярная особенность | EWSR1::FLI1 примерно в 85% случаев; реже встречаются другие слияния EWSR1 | Специфическое слияние EWSR1-FLI1 обычно отсутствует; характерен сложный геномный профиль |
| Цитогенетический эквивалент | t(11;22)(q24;q12) | Специфической транслокации, аналогичной t(11;22), нет |
| Морфология | Мономорфные мелкие круглые клетки, иногда с гликогеном и светлой цитоплазмой | Мелкие злокачественные клетки в сочетании с продукцией опухолевого остеоида |
| Иммуногистохимия | Обычно диффузная мембранная экспрессия CD99, часто ядерная экспрессия NKX2.2 | CD99 может экспрессироваться очагово или диффузно, но специфичность ограничена; важен остеогенный профиль |
| Амплификация MYCN и PHOX2B | Не являются типичными маркерами | Не являются типичными маркерами |
| Слияние ETV6-NTRK3 | Не характерно | Не характерно; более типично для инфантильной фибросаркомы и некоторых других NTRK-ассоциированных опухолей |
| Оптимальная верификация | Морфология в сочетании с FISH, ОТ-ПЦР или NGS для выявления EWSR1-FLI1 | Выявление остеоида в биоптате и подтверждение остеогенной природы с учетом результатов молекулярного исследования |
Положительный результат на EWSR1-FLI1 имеет наибольшую диагностическую ценность при исследовании опухоли с типичной морфологией. Изолированная перестройка локуса EWSR1 без определения партнера не полностью специфична, поскольку встречается и при других саркомах. При отрицательном тесте на EWSR1-FLI1 необходимо учитывать редкие варианты саркомы Юинга и расширять панель молекулярного исследования. Окончательный диагноз устанавливают на основании совокупности морфологических, иммуногистохимических и генетических признаков.