2) возможность свободно циркулировать в периферической крови
3) наличие СD117-антигена на ее поверхности
4) наличие CD11b-антигена на ее поверхности
Гемопоэтические стволовые клетки в клинической практике выявляют преимущественно по экспрессии CD34 — трансмембранного гликопротеина, характерного для незрелых гемопоэтических клеток. Наиболее примитивная фракция обычно имеет фенотип CD34+CD38−, нередко также характеризуется отсутствием линейных маркеров (Lin−) и экспрессией CD90. CD34 не является абсолютно уникальным маркером стволовой клетки, поскольку присутствует и на ранних клетках-предшественниках, однако именно его определение методом проточной цитометрии используется для количественной оценки гемопоэтических стволовых и прогениторных клеток.
Функционально гемопоэтическая стволовая клетка обладает способностью к длительному самообновлению и дифференцировке во все основные ростки кроветворения. В норме такие клетки преимущественно локализуются в костном мозге; их появление в периферической крови возможно при физиологической или лекарственной мобилизации, например после применения гранулоцитарного колониестимулирующего фактора. Поэтому свободная циркуляция в крови не служит постоянным определяющим признаком.
Антиген CD117 (c-KIT) также встречается на ранних гемопоэтических клетках, но он менее специфичен и экспрессируется на различных клетках-предшественниках и других клеточных популяциях. CD11b, напротив, является маркером преимущественно миелоидной дифференцировки и зрелых или созревающих клеток гранулоцитарно-моноцитарного ряда. Таким образом, наиболее корректным ответом в рамках стандартной иммунологической характеристики является наличие CD34 на поверхности клетки.
| Признак или маркер | Типичная характеристика | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| CD34 | Экспрессируется на гемопоэтических стволовых и ранних прогениторных клетках | Основной маркер для выявления и подсчёта CD34+-клеток при проточной цитометрии и оценке трансплантационного материала |
| CD38 | Наиболее примитивные стволовые клетки часто CD38−; по мере созревания экспрессия повышается | Помогает отделить более раннюю стволовую фракцию CD34+CD38− от клеток-предшественников |
| CD117 (c-KIT) | Рецептор фактора стволовых клеток; выявляется на ранних гемопоэтических клетках и ряде других клеток | Поддерживает незрелый фенотип, но не является самостоятельным специфичным признаком гемопоэтической стволовой клетки |
| CD11b | Интегрин миелоидных клеток, характерный для гранулоцитарно-моноцитарного направления дифференцировки | Свидетельствует о миелоидной принадлежности или созревании, а не о стволовом статусе |
| Lin-маркеры | Отсутствуют на недифференцированных клетках и появляются при созревании клеток различных линий | Комбинация Lin− с CD34 и CD38 повышает точность выделения незрелой гемопоэтической популяции |
| Циркуляция в периферической крови | В норме стволовые клетки преимущественно находятся в костном мозге; выход усиливается при мобилизации | Факт обнаружения в крови не определяет стволовой статус без иммунophenотипической и функциональной оценки |
В клинической практике количество CD34+-клеток имеет принципиальное значение при заготовке периферических гемопоэтических стволовых клеток и контроле дозы трансплантата. Иммунophenотип оценивают не по одному маркеру, а в составе панели, поскольку CD34 экспрессируется и на клетках-предшественниках. Окончательное подтверждение стволовых свойств связано с функциональной способностью к длительному восстановлению кроветворения и репопуляции костного мозга.