2) Deg
3) MI
4) MII (+)
Для интрацитоплазматической инъекции сперматозоида (ИКСИ) используют ооциты, достигшие стадии метафазы II (MII). Это зрелый ооцит, завершивший первое мейотическое деление и остановившийся перед вторым делением; обычно его зрелость подтверждается наличием первого полярного тельца. На этой стадии ооцит обладает необходимой ядерной и цитоплазматической компетентностью для активации, формирования мужского и женского пронуклеусов и последующего развития эмбриона.
Стадии GV и MI соответствуют незрелым ооцитам: при GV сохраняется зародышевый пузырёк, а при MI ооцит находится в метафазе первого мейотического деления и ещё не образовал первое полярное тельце. Такие клетки не подвергают ИКСИ непосредственно, хотя в отдельных случаях возможно их дозревание in vitro с последующим использованием при достижении MII. Ооциты с дегенеративными изменениями (Deg) имеют признаки утраты жизнеспособности и для микроинъекции непригодны.
Морфологическая оценка MII включает анализ прозрачности цитоплазмы, однородности ооплазмы, состояния первого полярного тельца и, при возможности, веретена деления. Наличие стадии MII является необходимым условием, но не гарантирует оплодотворение: на результат также влияют качество сперматозоида, корректность инъекции и способность ооцита к активации.
| Стадия ооцита | Состояние мейоза | Основной морфологический признак | Тактика при ИКСИ |
|---|---|---|---|
| GV | Профаза I, зародышевый пузырёк сохранён | Видимое ядро, первое полярное тельце отсутствует | Непосредственно не используют; возможна попытка дозревания in vitro |
| MI | Метафаза I | Зародышевый пузырёк исчез, первое полярное тельце ещё не сформировано | Для стандартной ИКСИ непригоден; оценивают возможность дальнейшего созревания |
| MII | Метафаза II, второе мейотическое деление приостановлено | Обычно определяется первое полярное тельце; присутствует зрелое веретено деления | Основная стадия для проведения ИКСИ |
| MII после дозревания in vitro | Ооцит достиг метафазы II вне организма | Появление первого полярного тельца и признаков ядерного созревания | Может быть использован, хотя его потенциал обычно ниже, чем у ооцита, созревшего in vivo |
| Deg | Мейотическая стадия не подлежит корректной оценке из-за дегенерации | Лизис, выраженная гранулярность, потемнение цитоплазмы, повреждение мембраны или фрагментация | Не используют для ИКСИ |
| Активированный ооцит после ИКСИ | Завершается второе мейотическое деление | Экструзия второго полярного тельца, далее формирование двух пронуклеусов | Оценивают как признак нормального оплодотворения, а не как исходную стадию для инъекции |
После введения сперматозоида зрелый ооцит должен активироваться и завершить второе мейотическое деление. Нормальное оплодотворение обычно подтверждают выявлением двух пронуклеусов и двух полярных телец примерно через 16–18 часов после ИКСИ. Поэтому правильный выбор MII отражает не только морфологическую зрелость, но и готовность ооцита к активации и раннему эмбриональному развитию.