2) HOS-тест (+)
3) TUNEL-тест
4) МАR-тест
Акиноспермия характеризуется отсутствием подвижности сперматозоидов, однако неподвижные клетки могут быть как жизнеспособными, так и погибшими. Поэтому при подготовке к ИКСИ необходимо установить сохранность клеточной мембраны и выбрать живой сперматозоид, даже если он не демонстрирует движения.
HOS-тест (hypo-osmotic swelling test, тест гипоосмотического набухания) основан на способности интактной мембраны жизнеспособного сперматозоида пропускать воду в гипоосмотической среде. В результате развивается набухание клетки и характерное заворачивание или скручивание хвоста — положительная HOS-реакция. Мертвые сперматозоиды с поврежденной мембраной такой реакции не дают, поэтому для ИКСИ выбирают неподвижные, но HOS-положительные клетки.
Другие методы оценивают иные характеристики сперматозоидов и не решают основную задачу при акиноспермии. HBA-тест определяет связывание зрелых сперматозоидов с гиалуроновой кислотой, TUNEL — фрагментацию ДНК, а MAR-тест — наличие антиспермальных антител. Эти исследования могут дополнять обследование, но не позволяют непосредственно отличить живой неподвижный сперматозоид от погибшего.
| Метод или критерий | Что оценивает | Типичный результат | Значение при акиноспермии |
|---|---|---|---|
| HOS-тест | Функциональную целостность плазматической мембраны и жизнеспособность | Набухание клетки и изгиб хвоста при положительной реакции | Основной метод выбора живого неподвижного сперматозоида для ИКСИ |
| HOS-положительный сперматозоид | Сохранность мембранных функций | Хвост скручивается или образует характерную петлю | Предпочтителен для инъекции при отсутствии собственной подвижности |
| HOS-отрицательный сперматозоид | Отсутствие осмотической реакции мембраны | Форма клетки не изменяется | Чаще соответствует нежизнеспособной клетке и не используется для ИКСИ |
| HBA-тест | Связывание сперматозоида с гиалуроновой кислотой и признаки функциональной зрелости | Фиксация зрелых клеток на субстрате с гиалуронаном | Не заменяет тест на жизнеспособность при полной неподвижности |
| TUNEL-тест | Фрагментацию ДНК сперматозоидов | Выявление разрывов цепей ДНК | Оценивает генетическую целостность, но не факт жизнеспособности клетки |
| MAR-тест | Антиспермальные антитела на поверхности сперматозоидов | Связывание частиц с иммуноглобулинами на клетке | Используется для диагностики иммунного фактора бесплодия, а не для отбора живых клеток |
Положительная HOS-реакция подтверждает, что неподвижный сперматозоид сохраняет жизнеспособность, но не гарантирует нормальную структуру аксонемы, отсутствие фрагментации ДНК или высокую оплодотворяющую способность. При отрицательной реакции у большинства клеток следует дифференцировать выраженную астенозооспермию с некрозооспермией и рассматривать дополнительные варианты получения сперматозоидов по клиническим показаниям. Окончательный выбор клетки для ИКСИ проводят с учетом ее морфологии, мембранной жизнеспособности и особенностей лабораторного протокола.