2) столика микроскопа
3) сперматозоида
4) яйцеклетки во время проведения ICSI (+)
Холдинг-пипетка — это микроманипуляторная пипетка с относительно широким рабочим отверстием, предназначенная для фиксации ооцита за счёт контролируемого отрицательного давления. Во время ИКСИ она мягко прижимает ооцит к поверхности пипетки и удерживает его в стабильном положении в чашке Петри, пока инъекционная пипетка проходит через клеточную оболочку и вводит сперматозоид в ооплазму.
Фиксация ооцита необходима для точного контроля направления прокола зоны pellucida и плазматической мембраны, а также для предотвращения вращения или смещения клетки при манипуляции. Холдинг не предназначен для удержания сперматозоида: его обездвиживание и захват выполняются инъекционной пипеткой. Чашка и предметный столик микроскопа остаются неподвижными самостоятельно и не являются объектами действия холдинга.
Работа с ооцитом проводится под инвертированным микроскопом с использованием микроманипуляторов, позволяющих отдельно управлять удерживающей и инъекционной пипетками. После завершения введения сперматозоида отрицательное давление уменьшают, и ооцит осторожно освобождают, контролируя его целостность и отсутствие выраженной деформации.
| Инструмент или элемент системы | Основная функция | Объект воздействия | Механизм или отличительный признак |
|---|---|---|---|
| Холдинг-пипетка | Фиксация клетки в заданном положении | Ооцит | Мягкая аспирация части ооплазмы или прилежащей поверхности клетки через широкий кончик |
| Инъекционная пипетка | Захват и введение сперматозоида | Сперматозоид и ооцит | Тонкий кончик; используется для обездвиживания сперматозоида, прокола ооцита и депонирования сперматозоида |
| Чашка для ИКСИ | Размещение капель среды и биологического материала | Рабочая зона процедуры | Не фиксируется холдингом; устойчивость обеспечивается конструкцией чашки и предметного столика |
| Микроманипулятор | Передача точных движений оператору | Холдинг- и инъекционная пипетки | Обеспечивает микрометровое позиционирование, поступательное движение и вращение пипетки |
| Пипетка для денудации | Удаление клеток кумулюса | Ооцит в комплексе кумулюс–ооцит | Подбирается по диаметру ооцита; применяется до оценки зрелости и проведения ИКСИ |
| Пипетка для биопсии | Получение клеток трофэктодермы | Бластоциста | Используется при преимплантационном генетическом тестировании, а не для фиксации ооцита при ИКСИ |
Таким образом, ключевая функция холдинга при ИКСИ заключается в пространственной стабилизации ооцита. Согласованная работа удерживающей и инъекционной пипеток снижает риск травмы ооцита и повышает точность введения сперматозоида. После инъекции оценивают сохранность ооцита и дальнейшее формирование пронуклеусов как признаки нормального оплодотворения.