2) оплодотворяют методом ICSI в исключительных случаях
3) оплодотворяют, если у пациентов не получили ни одного ооцита на стадии MII
4) всегда оплодотворяют, так как это дополнительный шанс наступления беременности
Ооцит на стадии GV (germinal vesicle, герминативный пузырёк) является незрелым: его ядро сохраняет оболочку, хромосомы находятся в профазе I мейоза, а первое полярное тельце отсутствует. Для стандартного проведения ICSI необходим зрелый ооцит на стадии метафазы II (MII), завершивший первое мейотическое деление и имеющий сформированное веретено второго деления. Поэтому введение сперматозоида непосредственно в GV-ооцит не обеспечивает нормального оплодотворения и не компенсирует его ядерную и цитоплазматическую незрелость.
Преждевременная инъекция сперматозоида может нарушить последовательность созревания, активации ооцита, деконденсации хроматина сперматозоида и формирования пронуклеусов. Кроме того, манипуляция вблизи крупного герминативного пузырька повышает риск механического повреждения внутриклеточных структур. Следовательно, отсутствие зрелых MII-ооцитов не является основанием для выполнения ICSI на стадии GV.
GV-ооцит допускается оставить в культуре для спонтанного или контролируемого созревания in vitro. Если он проходит распад герминативного пузырька, завершает первое деление мейоза и достигает стадии MII с экструзией первого полярного тельца, ICSI может быть выполнена уже после повторной оценки зрелости. Такой подход называют rescue-IVM; он характеризуется более низким потенциалом образования бластоцист и требует осторожного клинического применения, особенно после стандартной стимуляции яичников.
| Стадия ооцита | Морфологические признаки | Состояние мейоза | Тактика в отношении ICSI |
|---|---|---|---|
| GV | В цитоплазме визуализируется герминативный пузырёк, первое полярное тельце отсутствует | Профаза I, ядерная оболочка сохранена | ICSI непосредственно на этой стадии не выполняют |
| GVBD | Герминативный пузырёк исчезает, полярного тельца ещё нет | Возобновление мейоза после распада ядерной оболочки | Продолжают культивирование и наблюдение за созреванием |
| MI | Герминативный пузырёк не определяется, первое полярное тельце отсутствует | Метафаза первого мейотического деления | Ооцит считается незрелым; немедленная ICSI не является стандартной тактикой |
| Телофаза I | Полярное тельце формируется, возможна цитоплазматическая связь с ооцитом | Первое деление мейоза ещё не завершено | Необходима отсрочка до подтверждения полноценной стадии MII |
| MII | Определяется первое полярное тельце, герминативный пузырёк отсутствует | Метафаза второго мейотического деления | Оптимальная и стандартная стадия для выполнения ICSI |
| MII после rescue-IVM | Первое полярное тельце появилось во время дополнительного культивирования | Ядерное созревание достигнуто in vitro | ICSI возможно после повторной оценки, но ожидаемый потенциал развития ниже |
| Дегенеративный ооцит | Сморщивание, выраженная гранулярность, потемнение или нарушение целостности оолеммы | Необратимое повреждение либо утрата жизнеспособности | Для оплодотворения не используют |
Ключевым критерием допуска ооцита к ICSI служит не длительность его культивирования и не отсутствие других клеток, а подтверждённое достижение стадии MII. Экструзия первого полярного тельца отражает завершение первого мейотического деления, хотя в сомнительных случаях следует учитывать возможность поздней телофазы I. Цитоплазматическое созревание не всегда синхронно с ядерным, поэтому ооциты, дозревшие после пункции, обычно имеют меньшую компетентность к нормальному эмбриональному развитию. Таким образом, GV-ооцит можно культивировать, но инъекцию сперматозоида проводят только после его созревания до MII.