2) инвертированного микроскопа (+)
3) бионкуляра
4) поляризатора
ИКСИ выполняют под контролем инвертированного микроскопа, поскольку ооцит и сперматозоид находятся в капле культуральной среды на дне чашки. Объективы такого микроскопа расположены под предметным столиком и позволяют наблюдать клетку через дно чашки при большом увеличении, одновременно вводя микроинструменты сверху или сбоку. Оптическая система соединяется с микроманипуляторами, которые обеспечивают точное перемещение удерживающей и инъекционной пипеток.
Ключевой этап ИКСИ — фиксация ооцита удерживающей пипеткой, разрушение или прохождение зоны пеллюцида и введение единичного сперматозоида непосредственно в ооплазму. Для этого необходимы стабильная визуализация клеточных структур, достаточное рабочее расстояние и коаксиальное управление микропипетками, что обеспечивает комплекс инвертированный микроскоп — микроманипуляторы . Поляризационная оптика может применяться дополнительно для оценки веретена деления или двулучепреломления зоны пеллюцида, но обязательным условием проведения ИКСИ не является.
| Компонент или режим | Функция при ИКСИ | Степень необходимости |
|---|---|---|
| Инвертированный микроскоп | Наблюдение ооцита и сперматозоида через дно чашки при микроманипуляции | Обязателен |
| Микроманипуляторы | Точное управление удерживающей и инъекционной пипетками | Обязательны для стандартной процедуры |
| Удерживающая пипетка | Фиксация ооцита и стабилизация его положения во время инъекции | Обязательна |
| Инъекционная пипетка | Захват единичного сперматозоида и его введение в ооплазму | Обязательна |
| Светлопольный режим | Базовая визуализация клеток; может быть встроен в инвертированную оптическую систему | Используется, но отдельный прямой микроскоп не заменяет инвертированный |
| Поляризатор | Дополнительная оценка веретена деления и свойств зоны пеллюцида | Не обязателен; применяется по показаниям и при наличии соответствующей оптики |
Таким образом, определяющим оборудованием является не конкретный режим освещения, а инвертированная микроскопическая система, обеспечивающая визуальный контроль микроинъекции. Бинокулярная насадка улучшает наблюдение оператором, но сама по себе не обеспечивает необходимую геометрию работы с клеткой. Успешность процедуры также зависит от поддержания температуры, осмолярности и других параметров культуральной среды во время микроманипуляции.