2) L-карнитина в сперме
3) сперматозоидов с поврежденной ДНК
4) антиспермальных антител (+)
Тест на смешанную антиглобулиновую реакцию (MAR-тест) применяют для выявления антиспермальных антител, фиксированных на поверхности сперматозоидов. При прямом варианте исследования подвижные сперматозоиды смешивают с латексными частицами или эритроцитами, несущими иммуноглобулин человека; после добавления антиглобулиновой сыворотки частицы связываются с антителами на мембране сперматозоидов. В результате оценивают долю подвижных клеток, покрытых частицами.
Антиспермальные антитела преимущественно относятся к иммуноглобулинам классов IgG и IgA. Их присутствие может вызывать агглютинацию сперматозоидов, снижение прогрессивной подвижности, нарушение прохождения через цервикальную слизь, процессов капацитации и акросомальной реакции. Прямой MAR-тест определяет антитела, связанные со сперматозоидами, а непрямой позволяет исследовать антиспермальную антительную активность в сыворотке или семенной плазме.
Результат выражают как процент подвижных сперматозоидов, к которым присоединились диагностические частицы. В традиционной интерпретации значимое покрытие более 50% подвижных сперматозоидов расценивают как патологический результат; окончательная оценка проводится с учетом методики лаборатории и клинической ситуации. Исследование не предназначено для подсчета лейкоцитов, определения концентрации L-карнитина или прямой оценки фрагментации ДНК сперматозоидов.
| Метод или показатель | Что определяется | Основной принцип | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Прямой MAR-тест | Антитела на поверхности сперматозоидов | Связывание антиглобулиновых частиц с иммуноглобулинами, фиксированными на сперматозоидах | Оценка антиспермального иммунного фактора у мужчины |
| Непрямой MAR-тест | Антиспермальная антительная активность в биологических жидкостях | Инкубация исследуемой сыворотки или семенной плазмы с донорскими сперматозоидами | Используется, когда прямое исследование невозможно или требуется уточнить источник антител |
| Иммунобид-тест | Антитела на сперматозоидах и их локализация | Связывание иммунологически маркированных микросфер с антителами определенных классов | Дополнительная оценка распределения IgG и IgA на головке, шейке или хвосте сперматозоида |
| Пероксидазный тест | Лейкоциты в эякуляте | Цитохимическое выявление пероксидазоположительных гранулоцитов | Диагностика лейкоцитоспермии, но не антиспермальных антител |
| Тесты на фрагментацию ДНК | Повреждение хроматина сперматозоидов | Оценка разрывов ДНК методом TUNEL, SCSA, SCD или Comet | Характеризуют генетическую целостность сперматозоидов и не заменяют MAR-тест |
| Определение L-карнитина | Концентрация метаболита в семенной плазме | Биохимический анализ состава эякулята | Не является иммунологическим исследованием и не выявляет антитела |
Положительный MAR-тест особенно значим при сочетании с агглютинацией сперматозоидов и необъяснимым снижением их прогрессивной подвижности. Антиспермальные антитела могут формироваться после нарушения гемато-тестикулярного барьера, травм, воспалительных заболеваний или хирургических вмешательств на органах мошонки. Результат необходимо интерпретировать вместе со спермограммой, анамнезом и другими исследованиями мужской фертильности. При выраженном иммунном факторе бесплодия могут рассматриваться методы вспомогательных репродуктивных технологий, включая интрацитоплазматическую инъекцию сперматозоида.