2) целесообразна только после проведения биопсии трофоэктодермы с последующим преимплантационным генетическим тестированием на анеуплоидии
3) не применяется, т.к. такие бластоцисты не приводят к наступлению беременности
4) осуществляется в соответствии с рекомендациями производителя сред, применяемых для криоконсервации (+)
Витрификация бластоцист 6-х и 7-х суток развития возможна после достижения ими стадии бластоцисты и проводится по валидированному протоколу, соответствующему инструкции производителя криосред. Метод основан на быстром охлаждении эмбриона в присутствии высоких концентраций криопротекторов, что переводит раствор в стеклообразное состояние и предотвращает образование внутриклеточных кристаллов льда. Критически важны соблюдение времени экспозиции, последовательности растворов, объёма загрузки и условий хранения.
Позднее формирование бластоцисты само по себе не является противопоказанием к криоконсервации. Вылупление из zona pellucida не обязательно: витрифицировать можно расширенные, невыкупающиеся и частично вылупившиеся бластоцисты при наличии приемлемых морфологических характеристик. Биопсия трофэктодермы и преимплантационное генетическое тестирование на анеуплоидии могут выполняться по отдельным показаниям, но не являются обязательным условием витрификации. Бластоцисты 6–7-х суток способны приводить к имплантации и рождению детей, хотя в среднем репродуктивные показатели поздно развивающихся эмбрионов ниже, чем у бластоцист 5-х суток.
| Критерий | Практическое значение |
|---|---|
| Срок развития | Бластоцисты 6-х и 7-х суток могут быть криоконсервированы после достижения соответствующей стадии и оценки качества. |
| Степень расширения | Расширенная, ранняя или частично вылупившаяся бластоциста может подвергаться витрификации; полное вылупление не является обязательным условием. |
| Морфология | Учитываются степень расширения, качество внутренней клеточной массы и трофэктодермы; низкая морфологическая оценка снижает ожидаемую эффективность, но не всегда исключает криоконсервацию. |
| Генетическое тестирование | Биопсия трофэктодермы с последующим PGT-A является самостоятельной стратегией; после биопсии обычно выполняют витрификацию, но PGT-A не требуется для всех бластоцист. |
| Криопротекторы | Используются растворы для равновесия и витрификации с заданной концентрацией криопротекторов; превышение времени экспозиции повышает риск токсического повреждения. |
| Протокол лаборатории | Последовательность этапов, носитель, объём капли, скорость переноса и условия хранения определяются инструкцией производителя и локально валидированной стандартной операционной процедурой. |
| Размораживание | После согревания оценивают выживаемость клеток, восстановление экспансии и состояние внутренней клеточной массы и трофэктодермы; поствитрификационная выживаемость не зависит только от календарного дня развития. |
Таким образом, ключевым принципом является не обязательное вылупление или наличие генетического тестирования, а соблюдение проверенного протокола конкретной системы криоконсервации. Для бластоцист 7-х суток особенно важны оценка морфологии и информированное обсуждение прогноза с учётом более позднего развития. Решение о переносе принимают после согревания с учётом выживаемости эмбриона, его генетического статуса при наличии тестирования и клинических факторов.