2) 6-8
3) 10-18
4) 20-24
Колонии микоплазм на плотных питательных средах обычно становятся видимыми через 24–96 часов инкубации, поэтому правильным является первый вариант. Относительно длительное формирование колоний связано с низкой скоростью метаболических процессов, небольшим размером генома и высокой требовательностью микоплазм к составу среды. Для роста необходимы обогащённые среды с источниками холестерина и других липидов, поскольку микоплазмы не имеют клеточной стенки и не способны самостоятельно синтезировать ряд компонентов мембраны.
Характерный признак выросших колоний — мелкие, полупрозрачные образования с плотным центральным участком и более светлым периферическим ободком, напоминающие яичницу-глазунью . Такая структура обусловлена врастанием части колонии в агар и поверхностным расположением другой её части. В первые сутки колонии могут быть микроскопическими, поэтому ранний отрицательный результат посева не исключает инфекцию; оценку проводят после полного периода инкубации с учётом вида микоплазмы, состава среды и условий культивирования.
Указанный интервал относится к типичной лабораторной оценке роста микоплазм, однако отдельные виды, особенно Mycoplasma pneumoniae, могут формировать диагностически заметные колонии медленнее. Одной морфологии колоний недостаточно для видовой идентификации: результат подтверждают окраской или биохимическими тестами, MALDI-TOF-масс-спектрометрией либо методом ПЦР. Отсутствие клеточной стенки также объясняет естественную устойчивость микоплазм к β-лактамным антибиотикам.
| Признак | Микоплазмы | Практическое значение |
|---|---|---|
| Типичная видимость колоний | Через 24–96 часов | Пластины нельзя оценивать как окончательно отрицательные в первые часы инкубации |
| Морфология | Мелкие, прозрачные колонии типа яичницы-глазуньи | Помогает заподозрить микоплазмы при просмотре посева |
| Строение клеточной оболочки | Клеточная стенка отсутствует; имеется стеролсодержащая мембрана | Микроорганизмы плохо окрашиваются по Граму и устойчивы к β-лактамам |
| Питательные потребности | Обогащённые среды с холестерином, сывороткой и другими факторами роста | Использование обычных бактериологических сред может приводить к ложноотрицательному посеву |
| Условия культивирования | Температура и газовый режим подбираются с учётом вида; часто применяют 35–37 °C и повышенное содержание CO2 | Нарушение условий замедляет или полностью подавляет рост |
| Видовые различия | M. hominis обычно растёт быстрее, M. pneumoniae — медленнее | Сроки инкубации интерпретируют с учётом предполагаемого возбудителя |
| Подтверждение результата | ПЦР, MALDI-TOF, видоспецифические биохимические методы | Морфология колонии не заменяет окончательную идентификацию |
Интервал 24–96 часов отражает типичное время появления видимых колоний при правильно организованном культивировании. Для повышения диагностической чувствительности материал необходимо доставлять быстро и засевать на специализированные среды. При подозрении на микоплазменную инфекцию культуральный метод целесообразно дополнять ПЦР, особенно при медленно растущих или трудно культивируемых видах. Срок наблюдения посевов должен соответствовать методическим рекомендациям для конкретного возбудителя.