2) иммуноферментный (ИФМ) (+)
3) реакции связывания комплемента (РСК)
4) преципитации
Для серодиагностики ВИЧ-инфекции применяют иммуноферментный метод — иммуноферментный анализ (ИФА; в формулировке задания обозначен как ИФМ). Исследование выявляет в сыворотке крови специфические антитела к антигенам ВИЧ, а в современных тест-системах четвёртого поколения дополнительно — антиген p24. Антиген или антитела связываются с иммобилизованными компонентами тест-системы, после чего ферментная метка вызывает окрашенную реакцию; интенсивность окраски регистрируется прибором и коррелирует с количеством выявляемого маркера.
Высокая аналитическая чувствительность ИФА позволяет использовать его как основной скрининговый метод. Однако реактивный результат не является самостоятельным окончательным подтверждением ВИЧ-инфекции: необходимы повторное исследование и подтверждающий тест, например иммуноблоттинг или линейный иммунный анализ, а в спорных случаях — выявление РНК ВИЧ методом амплификации нуклеиновых кислот. При обследовании в период серологического окна антитела могут ещё отсутствовать, поэтому предпочтительны комбинированные тесты, определяющие антитела и антиген p24.
Реакции агглютинации, связывания комплемента и преципитации не используются как стандартные методы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции из-за недостаточной чувствительности, специфичности и технологической пригодности для массового скрининга. Их принцип основан на иных вариантах иммунного взаимодействия и не обеспечивает требуемой точности при низкой концентрации специфических маркеров. Поэтому правильным является иммуноферментный метод.
| Метод или тест | Определяемый маркер | Основное диагностическое назначение | Особенности и ограничения |
|---|---|---|---|
| ИФА третьего поколения | Антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 | Первичный серологический скрининг | Высокая чувствительность; результат может быть отрицательным в ранний период инфекции |
| Комбинированный ИФА четвёртого поколения | Антитела к ВИЧ и антиген p24 | Более раннее выявление инфекции | Сокращает серологическое окно, но реактивный результат требует подтверждения |
| Иммуноблоттинг или линейный иммунный анализ | Антитела к отдельным белкам ВИЧ | Подтверждение специфичности реактивного скринингового результата | Может быть неопределённым на ранней стадии; интерпретируется по установленным критериям |
| Амплификация нуклеиновых кислот | РНК ВИЧ | Подтверждение ранней инфекции и разрешение сомнительных результатов | Не относится к серологическим методам; обладает высокой информативностью до сероконверсии |
| Агглютинация | Иммунные комплексы в виде видимых агрегатов | Не является стандартным методом диагностики ВИЧ | Недостаточная чувствительность и риск неспецифических реакций для данной задачи |
| РСК и реакция преципитации | Комплемент-связанные или осаждаемые иммунные комплексы | Историческое или вспомогательное значение в других инфекционных заболеваниях | Не обеспечивают необходимой точности для современной диагностики ВИЧ-инфекции |
Диагноз устанавливают не по одному скрининговому результату, а по совокупности данных алгоритма подтверждения. При отрицательном результате и сохраняющемся эпидемиологическом риске исследование повторяют с учётом длительности периода окна. Выбор тест-системы должен учитывать возможность выявления ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и соответствовать действующим нормативным требованиям.