2) этерификации
3) гидролиза
4) диазотирования и азосочетания (+)
Подлинность лекарственных веществ с первичной ароматической аминогруппой подтверждают двухстадийной реакцией диазотирования и азосочетания. На первом этапе первичная ароматическая аминогруппа Ar–NH2 в присутствии нитрита натрия и минеральной кислоты при низкой температуре превращается в соль арилдиазония. Образование этого промежуточного соединения специфично для свободной первичной ароматической аминогруппы.
На втором этапе соль диазония вступает в реакцию азосочетания с фенолами или ароматическими аминами, например с β-нафтолом в щелочной среде. Формируется азосоединение с хромофорной группой –N=N–, обычно имеющее интенсивную жёлтую, оранжевую, красную или малиновую окраску. Появление характерного окрашенного продукта служит аналитическим признаком подлинности, тогда как реакции этерификации, гидролиза, конденсации и окисления не являются специфичными для данной функциональной группы.
| Исследуемая структура | Взаимодействие с нитритом в кислой среде | Последующая реакция | Диагностический признак |
|---|---|---|---|
| Первичная ароматическая аминогруппа Ar–NH2 | Диазотирование с образованием соли арилдиазония | Азосочетание с β-нафтолом или другим активированным ароматическим соединением | Интенсивное окрашивание вследствие образования азосоединения |
| Первичная алифатическая аминогруппа R–NH2 | Образуются нестабильные алифатические диазосоединения | Быстрое разложение с выделением азота и образованием побочных продуктов | Устойчивой специфичной окраски при стандартной постановке реакции нет |
| Вторичная ароматическая аминогруппа Ar–NH–R | Диазониевая соль не образуется | Возможна реакция N-нитрозирования | Отсутствует типичный результат диазотирования первичной аминогруппы |
| Третичная ароматическая аминогруппа Ar–NR2 | Классическое диазотирование невозможно из-за отсутствия атома водорода при азоте | Возможны иные реакции нитрозирования или электрофильного замещения | Специфическое азосочетание через соль диазония не проводится |
| Фенольная группа | Соль диазония самостоятельно не образует | Может выступать компонентом азосочетания с уже образованной солью диазония | Фенол является реагентом для выявления диазониевой соли, а не её источником |
| Ароматический амид типа ацетанилида | Свободная аминогруппа замаскирована ацильным остатком | После предварительного гидролиза высвобождается первичная ароматическая аминогруппа | Положительная реакция возможна после разрушения амидной защиты |
Для надёжного проведения диазотирования поддерживают кислую среду и обычно охлаждают реакционную смесь до 0–5 °C, поскольку соли арилдиазония термически неустойчивы. Избыток нитрита может удаляться сульфаминовой кислотой перед азосочетанием, чтобы он не мешал развитию окраски. Метод особенно ценен как групповая реакция идентификации в фармакопейном анализе соединений, сохраняющих свободную первичную ароматическую аминогруппу.