2) нингидриновую
3) эритрохинную
4) лигниновую (+)
Правильным является выбор лигниновой пробы. Большинство сульфаниламидов относится к производным п-аминобензолсульфонамида и содержит свободную первичную ароматическую аминогруппу. В условиях реакции она взаимодействует с альдегидными и карбонильными группами лигнина с образованием окрашенных продуктов конденсации; на лигниновой бумаге появляется желтое, желто-оранжевое или оранжевое окрашивание.
Проба выполняется быстро, требует минимального количества вещества и поэтому пригодна для предварительной идентификации сульфаниламидов при внутриаптечном или экспресс-контроле. Диагностически значимым признаком считается появление окраски после нанесения исследуемого раствора на лигниновую бумагу, обычно в кислой среде. Реакция не является абсолютно специфичной: отрицательный результат возможен у соединений, в которых ароматическая аминогруппа замещена или химически защищена, а положительную реакцию следует подтверждать фармакопейными методами.
Биуретовая реакция выявляет пептидные связи, отсутствующие в структуре сульфаниламидов. Нингидриновая проба предназначена прежде всего для аминокислот и первичных аминов и не обладает достаточной специфичностью для данной группы препаратов. Эритрохинная реакция относится к аналитическим пробам для иных классов органических соединений и не направлена на выявление характерного фрагмента сульфаниламидов.
| Метод или проба | Выявляемая структурная особенность | Наблюдаемый результат | Значение для сульфаниламидов |
|---|---|---|---|
| Лигниновая проба | Свободная первичная ароматическая аминогруппа | Желтое или оранжевое окрашивание лигниновой бумаги | Подходит для экспресс-идентификации большинства сульфаниламидов |
| Диазотирование с последующим азосочетанием | Ароматическая аминогруппа, способная образовывать диазониевую соль | Появление интенсивно окрашенного азокрасителя | Более специфичная подтверждающая реакция после предварительного анализа |
| Нингидриновая проба | Свободные аминогруппы, особенно в аминокислотах | Фиолетовые или сине-фиолетовые продукты реакции | Возможна неспецифическая реакция; стандартным экспресс-критерием для сульфаниламидов не является |
| Биуретовая проба | Две и более пептидные связи | Фиолетовый комплекс с ионами меди(II) в щелочной среде | Не применима, поскольку сульфаниламиды не имеют пептидного каркаса |
| Эритрохинная реакция | Специфические фрагменты соединений другого химического класса | Характерное окрашивание при соответствующей реакции | Не выявляет диагностическую структуру производных п-аминобензолсульфонамида |
| Подтверждающая идентификация | Совокупность физико-химических характеристик вещества | Совпадение ИК-спектра, данных ТСХ, температуры плавления или ВЭЖХ | Необходима для окончательного заключения о подлинности и качестве препарата |
Лигниновая реакция основана не на наличии сульфонамидной группы как таковой, а на сохранении свободной ароматической аминогруппы в молекуле. Поэтому ее результат оценивают с учетом химической структуры конкретного препарата и возможного влияния примесей. При контроле лекарственного средства положительная проба подтверждает принадлежность к соединениям с соответствующим аминным фрагментом, но не заменяет количественное определение. Окончательное заключение делают после применения валидированного фармакопейного метода.