2) железа (III) хлорид
3) диазореактив
4) нингидрина спиртовый раствор
Нитрофурал (фурацилин) содержит сопряжённую систему 5-нитрофуранового кольца и семикарбазонного фрагмента, определяющую его хромофорные свойства. При добавлении водного раствора натрия гидроксида происходит ионизация протонодонорных групп молекулы, изменение распределения электронной плотности и усиление сопряжения; в результате наблюдается характерное оранжево-красное, иногда переходящее в красно-бурое, окрашивание. Эта цветная реакция используется как качественный критерий подлинности препарата.
Остальные реагенты не дают столь специфичной фармакопейной реакции для нитрофурала. Железа(III) хлорид применяют преимущественно для выявления фенольных гидроксильных групп и некоторых енольных или комплексообразующих структур, которых в нитрофурале нет в диагностически значимой форме. Диазореакция характерна для свободных первичных ароматических аминов, а нингидрин — для аминокислот и первичных аминогрупп; азотсодержащие фрагменты нитрофурала химически не эквивалентны этим функциональным группам.
| Объект анализа | Выявляемый структурный признак | Наблюдаемый эффект | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Нитрофурал | Сопряжённая система нитрофуранового и семикарбазонного фрагментов | Способность к изменению окраски в щелочной среде | Формирует основу качественной реакции подлинности |
| Раствор натрия гидроксида | Щелочная среда, ионизация протонодонорных центров | Оранжево-красное или красно-бурое окрашивание | Положительная реакция, подтверждающая наличие нитрофурала |
| Железа(III) хлорид | Фенольные группы, енолы, некоторые хелатообразующие лиганды | Окрашенные комплексы образуются только при наличии соответствующих центров | Не является специфичным реагентом для нитрофурала |
| Диазореактив | Свободная первичная ароматическая аминогруппа | Азосочетание с образованием интенсивно окрашенного азосоединения | Для структуры нитрофурала диагностически нехарактерно |
| Нингидрин | Свободные α-аминогруппы аминокислот и некоторых аминов | Фиолетовые или сине-фиолетовые продукты реакции | Не используется как основная реакция подлинности нитрофурала |
| Оценка результата | Сопоставление окраски с нормативным описанием реакции | Учитываются интенсивность, оттенок и время появления окраски | Результат интерпретируют вместе с другими фармакопейными испытаниями |
Положительная реакция с натрия гидроксидом является цветной идентификационной реакцией, а не количественным определением содержания вещества. Для повышения достоверности анализ проводят при регламентированных концентрациях, объёмах реагентов и времени наблюдения, используя контроль реактивов. Окончательное подтверждение подлинности при необходимости получают инструментальными методами, например ИК-спектроскопией или ВЭЖХ. Таким образом, правильный выбор обусловлен характерным щелочным превращением хромофорной системы нитрофурала.