2) ацидиметрии
3) аргентометрии
4) прямой алкалиметрии
Этинилэстрадиол содержит фенольную гидроксильную группу в положении C3, обладающую слабыми кислотными свойствами. Спиртовая гидроксильная группа в положении C17 при обычных условиях титрования практически не ионизируется. Поэтому для количественного анализа используют избыток стандартизированного раствора щёлочи: фенольная группа образует растворимый фенолят, а непрореагировавший гидроксид затем оттитровывают стандартным раствором кислоты.
Такой подход называется методом косвенной нейтрализации, или обратного титрования. Содержание вещества рассчитывают по разности между количеством щёлочи, введённой в реакционную смесь, и её остатком, определённым ацидиметрически; холостой опыт учитывает расход реактива на побочные процессы и растворитель. Метод обеспечивает более надёжную фиксацию эквивалентной точки, чем непосредственное титрование слабой фенольной кислоты, особенно с учётом низкой растворимости стероидного соединения в воде.
Ацидиметрия в прямом варианте не соответствует химической природе этинилэстрадиола, поскольку молекула не содержит достаточно сильного основного центра. Аргентометрия применяется главным образом для определения галогенидов и других соединений, образующих малорастворимые соли серебра, которых в структуре аналита нет. Прямая алкалиметрия затруднена слабой кислотностью фенольной группы и недостаточно чётким конечным пунктом.
| Структурный фрагмент или метод | Химическая особенность | Аналитическое значение |
|---|---|---|
| Фенольная группа C3–OH | Слабокислотный протон, способный замещаться щёлочью | Обеспечивает реакцию нейтрализации и расчёт содержания вещества |
| Спиртовая группа C17–OH | Практически не проявляет кислотных свойств в условиях анализа | Не является основным центром титрования |
| Косвенная нейтрализация | Избыток щёлочи реагирует с аналитом, остаток титруют кислотой | Основной метод количественного определения этинилэстрадиола |
| Прямая алкалиметрия | Непосредственное титрование слабой фенольной кислоты щёлочью | Менее надёжна из-за слабой выраженности кислотных свойств и проблем с растворимостью |
| Ацидиметрия | Титрование оснований стандартной кислотой | Не подходит: в молекуле отсутствует достаточно сильный основной центр |
| Аргентометрия | Основана на образовании малорастворимых соединений серебра | Не используется, поскольку этинилэстрадиол не содержит определяемого галогенид-иона |
Ключевым критерием выбора метода является наличие фенольной, а не обычной спиртовой гидроксильной группы. Обратное титрование повышает точность определения слабокислотного соединения и позволяет компенсировать неполное протекание прямой реакции. В расчётах учитывают стандартность растворов, объём израсходованной кислоты и результат холостого опыта. Поэтому в фармацевтическом анализе этинилэстрадиол относят к веществам, для которых рациональна косвенная нейтрализация.