2) метилсульфата
3) ароматического кольца
4) сложноэфирной группы
Классический метод Кьельдаля основан на переводе органически связанного азота в процессе кислотной минерализации в ион аммония, обычно в форме сульфата аммония. После подщелачивания аммиак выделяют перегонкой и количественно определяют титрованием; количество аммиака эквивалентно содержанию азота в навеске. По стехиометрическому коэффициенту рассчитанное содержание азота пересчитывают на количество неостигмина метилсульфата.
В структуре неостигмина присутствуют азотсодержащие фрагменты, включая четвертичный аммониевый атом азота и азот карбаматной группы. При полном разложении вещества в условиях минерализации они становятся источником аммонийного азота, что и обеспечивает возможность количественного анализа методом Кьельдаля. Мethylсульфат-ион содержит углерод, водород, серу и кислород, но не содержит азота; ароматическое кольцо и сложноэфирная связь сами по себе также не являются аналитической основой данного метода.
| Структурный фрагмент или этап анализа | Химическая характеристика | Значение для метода Кьельдаля |
|---|---|---|
| Органически связанный азот | Атомы азота входят в ковалентную структуру лекарственного вещества | Определяемый аналитический признак; после минерализации количественно учитывается через аммоний |
| Четвертичный аммониевый фрагмент | Положительно заряженный атом азота связан с органическими заместителями | При разрушении структуры в условиях кислотной минерализации участвует в образовании аммонийного азота |
| Карбаматный азот | Азот входит в состав диметилкарбамоильной группы | Дополнительный источник азота, учитываемый при расчёте общего содержания вещества |
| Мethylсульфат-ион | Содержит метильную группу, серу и кислород; азот отсутствует | Не формирует аммиак и не определяет количественный результат по Кьельдалю |
| Ароматическое кольцо | Углеродный фрагмент бензольного ряда без атома азота | Не служит субстратом для образования аммония; выполняет структурную, а не аналитическую функцию |
| Сложноэфирная связь | Функциональная группа с участием карбонильного углерода и кислорода | Может разрушаться при минерализации, но сама не содержит азота и не является количественной основой метода |
| Подщелачивание и перегонка | Ион аммония переводится в летучий аммиак | Обеспечивает отделение определяемого компонента и последующее титриметрическое измерение |
Надёжность результата зависит от полноты минерализации и количественного выделения аммиака. При расчёте учитывают холостой опыт, массу навески и установленный фактор пересчёта содержания азота на неостигмина метилсульфат. Метод является суммарным: он оценивает азот после разрушения исходной молекулы, а не сохраняет информацию о конкретном типе азотсодержащей группы. Поэтому структурные фрагменты без азота не могут заменить наличие органического азота как обоснование анализа.