2) разделении смеси анализируемых веществ в колонке между подвижной и неподвижной фазами
3) поглощении молекулой анализируемого вещества электромагнитных волн определенной частоты
4) определении массы анализируемого вещества методом гравиметрии
Масс-спектрометрия основана на превращении молекул исследуемого вещества в заряженные частицы с последующим разделением образовавшихся ионов по отношению массы к заряду — m/z. Ионизация может осуществляться различными способами, включая электронную ионизацию, химическую ионизацию, электроспрей и матрично-активированную лазерную десорбцию/ионизацию. Выбор ионного источника зависит от летучести, термостабильности, молекулярной массы и полярности определяемого соединения.
После ионизации поток ионов поступает в масс-анализатор, где частицы разделяются под действием электрических или магнитных полей, а затем регистрируются детектором. Полученный масс-спектр представляет зависимость интенсивности сигнала от m/z и позволяет определять молекулярную массу, изотопный состав и характерные фрагменты молекулы. В фармацевтическом анализе метод применяют для идентификации лекарственных веществ, установления структуры примесей, подтверждения подлинности природных соединений и количественного определения компонентов, особенно в сочетании с газовой или жидкостной хроматографией.
| Метод анализа | Физическая основа | Основной аналитический результат | Отличительный признак |
|---|---|---|---|
| Масс-спектрометрия | Ионизация и разделение ионов по отношению m/z | Молекулярная масса, фрагментация, изотопный профиль | Регистрируются заряженные частицы |
| Хроматография | Различное распределение веществ между подвижной и неподвижной фазами | Время удерживания и площадь хроматографического пика | Основная задача — разделение компонентов смеси |
| УФ- и видимая спектрофотометрия | Поглощение электромагнитного излучения электронными группами молекулы | Оптическая плотность и спектр поглощения | Не требует образования ионов |
| ИК-спектроскопия | Поглощение инфракрасного излучения при колебательных переходах | Характеристические полосы функциональных групп | Используется для подтверждения химической структуры |
| ЯМР-спектроскопия | Резонанс ядер в магнитном поле | Химические сдвиги и спин-спиновые взаимодействия | Дает сведения о взаимном расположении атомов |
| Гравиметрический анализ | Точное измерение массы выделенного соединения или продукта реакции | Массовая доля определяемого компонента | Относится к классическим химическим методам количественного анализа |
Масс-спектрометрию не следует отождествлять с простым измерением массы вещества: аналитический сигнал формируется при регистрации ионов, а не при взвешивании образца. Высокая селективность метода связана с сочетанием точного значения m/z, изотопного распределения и спектра фрагментации. Тандемная масс-спектрометрия дополнительно позволяет последовательно выделять и разрушать выбранные ионы, что существенно повышает надежность идентификации и чувствительность количественного анализа лекарственных веществ.