2) кальция глюконата
3) натрия хлорида
4) воды очищенной
Метод Кьельдаля применим для количественного определения кислоты глутаминовой, поскольку её молекула содержит один атом органически связанного азота в составе аминогруппы. При минерализации образца концентрированной серной кислотой в присутствии катализатора органический азот превращается в ион аммония. После подщелачивания выделившийся аммиак отгоняют с водяным паром и определяют титриметрически; количество азота пропорционально содержанию кислоты глутаминовой.
Метод является способом определения общего азота, поэтому сам по себе не обладает абсолютной специфичностью к глутаминовой кислоте. Однако при анализе индивидуального вещества, не содержащего других азотистых соединений, по количеству азота рассчитывают содержание аминокислоты с учётом стехиометрического коэффициента: одна молекула кислоты глутаминовой соответствует одному атому азота. Кальция глюконат, натрия хлорид и вода очищенная азота не содержат, поэтому данный метод не может служить для их прямого количественного определения.
| Объект анализа | Наличие определяемого азота | Что происходит при анализе по Кьельдалю | Пригодность метода |
|---|---|---|---|
| Кислота глутаминовая | Содержит одну аминогруппу и один атом азота | Азот переводится в аммоний, затем аммиак отгоняется и титруется | Применим; содержание вещества рассчитывают по количеству азота |
| Другие индивидуальные аминокислоты | Как правило, содержат органически связанный азот | Определяется суммарный азот с последующим пересчётом | Возможен при отсутствии посторонних азотистых примесей |
| Кальция глюконат | Азот отсутствует; присутствует кальций | Аммоний и аммиак в ходе минерализации не образуются | Непригоден; предпочтительно комплексонометрическое определение кальция |
| Натрия хлорид | Азот отсутствует | Титруемый аммиак не образуется | Непригоден; используют аргентометрические или потенциометрические методы |
| Вода очищенная | Органический азот отсутствует | Отсутствует аналитический сигнал, связанный с образованием аммиака | Непригоден; содержание воды определяют, например, методом Карла Фишера |
| Ограничение метода | Учитывается любой азот, способный перейти в аммоний | Возможна суммация сигнала от разных азотистых соединений | Нужны чистый объект анализа и подтверждение специфичности методики |
Таким образом, ключевым критерием выбора метода Кьельдаля является наличие в анализируемом соединении органически связанного азота. Для кислоты глутаминовой этот признак сочетается с простой стехиометрией, поскольку в молекуле содержится один атом азота. Метод особенно обоснован при анализе чистой субстанции или образца без других азотистых компонентов. При наличии смеси результат будет характеризовать суммарное содержание азота, а не обязательно концентрацию только глутаминовой кислоты.