2) борной кислотой (II) (+)
3) концентрированной кислотой хлористоводородной
4) натрия гидрокарбонатом
Правильный ответ — борная кислота. Флавоноидные агликоны с незамещёнными гидроксильными группами при C3 и C5 способны образовывать с борной кислотой координационные, или хелатные, комплексы с участием атомов кислорода гидроксильных и карбонильной групп. Образование такого комплекса изменяет электронную систему сопряжения молекулы и сопровождается характерным изменением окраски или флуоресценции, что используется как качественный аналитический признак.
Диагностическое значение реакции обусловлено именно свободным состоянием гидроксильных групп: их гликозилирование или метилирование уменьшает либо устраняет способность к комплексообразованию. Реакция с ванилином преимущественно выявляет флаван-3-олы и конденсированные проантоцианидины, концентрированная хлористоводородная кислота применяется для кислотно-катализируемых превращений отдельных классов флавоноидов, а гидрокарбонат натрия реагирует главным образом с карбоксильными кислотами и не является специфичным реагентом на фенольные гидроксилы.
| Реагент или структурный фрагмент | Химическая основа реакции | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Борная кислота | Координация атомов кислорода свободных гидроксильных и карбонильной групп с образованием борсодержащего комплекса | Выявление незамещённых гидроксильных групп в участках C3 и C5 флавоноидного агликона |
| Гидроксильная группа при C5 и 4-кетогруппа | Формирование устойчивого внутримолекулярного координационного центра | Усиление комплексообразования и появление характерного спектрального сдвига |
| Гидроксильная группа при C3 и 4-кетогруппа | Дополнительный донорно-акцепторный участок для связывания борной кислоты | Подтверждение наличия свободного 3-гидроксильного фрагмента, типичного для флавонолов |
| Ванилин в кислой среде | Кислотно-катализируемая конденсация с реакционноспособными центрами флаван-3-олов | Обнаружение катехинов и проантоцианидинов; реакция не специфична для сочетания C3— и C5-OH |
| Концентрированная хлористоводородная кислота | Протонирование и кислотно-катализируемые превращения флавоноидов | Может использоваться в реакциях образования окрашенных продуктов, но не является селективным тестом на свободные C3— и C5-OH |
| Гидрокарбонат натрия | Кислотно-основная реакция с карбоксильными группами с выделением углекислого газа | Фенольные гидроксилы флавоноидов обычно не дают специфической реакции с образованием CO2 |
Результат борнокислотной пробы следует оценивать с учётом строения исследуемого соединения и условий проведения реакции. Отсутствие окраски не всегда означает отсутствие флавоноидного ядра, поскольку сигнал может снижаться при гликозилировании, алкилировании или пространственной экранированности гидроксильных групп. Для подтверждения структуры применяют тонкослойную хроматографию, УФ-спектроскопию со сдвигающими реагентами и сопоставление с фармакопейным стандартом.