2) обратимые ионообменные процессы, происходящие между ионогенными группами сорбента и ионами анализируемого вещества в растворе
3) процесс разделения смеси веществ, протекающий на полосе хроматографической бумаги под воздействием капиллярных сил при передвижении подвижной жидкой фазы
4) процесс разделения смеси веществ, протекающий на твердом тонком слое сорбента под воздействием адсорбционного механизма при движении подвижной жидкой фазы (+)
Тонкослойная хроматография — метод разделения и идентификации компонентов смеси, при котором неподвижная фаза нанесена в виде тонкого слоя твердого сорбента на пластинку, обычно из стекла, алюминия или полимерного материала. Наиболее часто используют силикагель, реже — оксид алюминия, целлюлозу и другие модифицированные сорбенты. Исследуемую пробу наносят в виде небольшого пятна у стартовой линии, после чего пластинку помещают в камеру с растворителем.
Подвижная жидкая фаза перемещается по слою сорбента преимущественно за счет капиллярных сил, а компоненты смеси многократно сорбируются и десорбируются. Вещество, обладающее большей адсорбционной способностью к неподвижной фазе, перемещается медленнее; соединения, лучше растворимые в элюенте, продвигаются дальше. Поэтому разделение происходит на твердом тонком слое при движении жидкой фазы, что соответствует варианту 4. В отличие от высокоэффективной жидкостной хроматографии, метод не требует подачи элюента под высоким давлением.
Основным количественным критерием при оценке хроматограммы является коэффициент удерживания Rf — отношение расстояния, пройденного зоной вещества от стартовой линии, к расстоянию, пройденному фронтом растворителя. Для обнаружения зон применяют ультрафиолетовое освещение, пары йода или специфические химические реагенты. Значение Rf используют преимущественно для сравнения с референтным веществом при одинаковых условиях анализа, поскольку оно зависит от состава элюента, типа сорбента, температуры и насыщения камеры.
| Метод | Неподвижная фаза | Движение подвижной фазы | Основной механизм и отличительный признак |
|---|---|---|---|
| Тонкослойная хроматография | Тонкий слой силикагеля, оксида алюминия или другого сорбента на пластинке | Капиллярное перемещение растворителя | Преимущественно адсорбционное разделение; оценка зон по положению и значению Rf |
| Бумажная хроматография | Хроматографическая бумага, удерживающая слой воды и другие компоненты системы | Капиллярное перемещение элюента по бумаге | Преимущественно распределительный механизм; разделение происходит на бумажном носителе, а не на твердом адсорбенте |
| Колонночная адсорбционная хроматография | Слой сорбента, заполненный в колонку | Протекание элюента через колонку под действием силы тяжести или давления | Разделение основано на различии адсорбции; метод удобен для выделения фракций в большем количестве |
| Высокоэффективная жидкостная хроматография | Мелкодисперсный сорбент в герметичной колонке | Подача элюента насосом под высоким давлением | Инструментальный высокоразрешающий метод с регистрацией хроматографических пиков, а не пятен на пластинке |
| Ионообменная хроматография | Сорбент с фиксированными катионными или анионными группами | Раствор проходит через слой ионообменника | Обратимый обмен ионов анализируемого вещества с противоионами сорбента; разделение определяется зарядом и сродством к ионогенным группам |
| Распределительная хроматография | Неподвижная жидкая фаза, удерживаемая на носителе | Перемещение жидкого или газового элюента | Разделение основано на различии коэффициентов распределения веществ между двумя фазами, а не только на адсорбции |
Тонкослойная хроматография особенно широко применяется для экспресс-контроля подлинности, чистоты и состава лекарственного растительного сырья, фитопрепаратов и органических соединений. Надежность результата обеспечивается стандартизацией сорбента, элюента, объема нанесенной пробы и условий проявления. Совпадение положения и окраски зоны с референтным образцом повышает доказательность идентификации, но при необходимости подтверждается спектральными или хроматографическими методами.