2) УФ-спектроскопии
3) флуориметрии
4) масс-спектроскопии (+)
При аттестации первичного стандартного образца необходимо подтвердить его подлинность и установить соответствие заявленной химической структуре. Масс-спектрометрия основана на ионизации вещества и регистрации отношения массы иона к его заряду (m/z). Молекулярный ион позволяет определить молекулярную массу и элементный состав, изотопный профиль — уточнить наличие отдельных элементов, а характер фрагментации — выявить особенности строения молекулы и расположения функциональных групп. В тандem-масс-спектрометрии анализ дочерних ионов дополнительно повышает достоверность структурной идентификации.
БИК-спектрометрия преимущественно используется для экспресс-контроля состава, идентификации и оценки однородности образцов по совокупности полос поглощения, но обычно не обеспечивает однозначного установления полной структуры. УФ-спектроскопия характеризует хромофорные системы и степень сопряжения, а флуориметрия — способность вещества к возбуждению и испусканию света; эти методы имеют ограниченную структурную специфичность. Поэтому среди предложенных методов именно масс-спектроскопия наиболее непосредственно предоставляет информацию о молекулярной массе и диагностических фрагментах, необходимую для подтверждения структурной формулы.
| Метод | Регистрируемый параметр | Основная структурная информация | Роль при аттестации |
|---|---|---|---|
| Масс-спектроскопия | Отношение массы иона к его заряду, интенсивность фрагментов | Молекулярная масса, элементный состав, изотопный профиль, особенности фрагментации | Подтверждение молекулярной структуры и идентичности вещества |
| БИК-спектрометрия | Поглощение ближнего инфракрасного излучения | Совокупный спектральный профиль, связанный с валентными и комбинационными колебаниями связей | Экспресс-идентификация, контроль однородности и технологических параметров |
| УФ-спектроскопия | Поглощение ультрафиолетового излучения | Наличие хромофоров, ароматических систем и сопряжённых связей | Идентификация и количественное определение соединений с подходящими хромофорами |
| Флуориметрия | Интенсивность и спектр люминесценции после возбуждения | Флуоресцентные свойства молекулы, наличие флуорофоров | Высокочувствительное определение отдельных веществ, но не универсальное установление структуры |
| Фрагментация ионов | Набор дочерних ионов и их относительная интенсивность | Диагностические структурные фрагменты и возможные пути распада молекулы | Различение соединений с одинаковой или близкой молекулярной массой |
| Изотопный паттерн | Соотношение пиков изотопных ионов | Признаки элементов с характерным природным распределением изотопов | Дополнительное подтверждение элементного состава образца |
Результаты масс-спектрометрии сопоставляют с теоретическим спектром, библиотечными данными и нормативной документацией на стандартный образец. Для окончательной комплексной характеристики вещества могут дополнительно применяться ЯМР-спектроскопия, инфракрасная спектроскопия, хроматографические и рентгеноструктурные методы. Однако в представленном перечне только масс-спектроскопия непосредственно сочетает определение молекулярной массы с анализом диагностических фрагментов. Это и обосновывает выбор данного метода при установлении структурной формулы первичного стандартного образца.