2) ароматических аминопроизводных
3) ароматических нитропроизводных (+)
4) алкалоидов
Лактонное кольцо, прежде всего α,β-ненасыщенное γ-лактонное кольцо карденолидов, выявляют реактивами, содержащими ароматические нитрогруппы. К этой группе относятся 3,5-динитробензойная кислота в реакции Кедде, мета-динитробензол в реакции Раймонда и пикратные реагенты в реакции Балье. В щелочной среде сопряжённая система лактонного фрагмента и активированный метиленовый участок вступают в реакцию с электронодефицитным ароматическим нитросоединением, вследствие чего образуется интенсивно окрашенный продукт.
Диагностическим признаком служит появление характерной окраски: обычно фиолетовой или пурпурной в реакции Кедде и Раймонда, оранжевой в реакции Балье. Такая проба указывает именно на наличие реакционноспособного ненасыщенного лактонного фрагмента, характерного для сердечных гликозидов; она не является универсальной реакцией на любой лактон. Отсутствие окраски возможно при насыщенном лактонном кольце, недостаточной щёлочности среды или разрушении вещества.
Диазосоединения и ароматические аминопроизводные преимущественно используют для реакций азосочетания с фенольными или другими ароматическими фрагментами, а не для специфического обнаружения лактонного кольца. Алкалоиды представляют отдельный класс природных азотсодержащих соединений и не являются стандартной группой реагентов для этой функциональной пробы. Поэтому правильным является выбор ароматических нитропроизводных.
| Реакция или условие | Основной реагент | Выявляемая структурная особенность | Типичная окраска | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|---|
| Кедде | 3,5-динитробензойная кислота и щёлочь | α,β-Ненасыщенное лактонное кольцо | Фиолетовая, пурпурная или красно-фиолетовая | Характерна для карденолидов; одна из наиболее применяемых проб на лактонный фрагмент |
| Раймонда | м-Динитробензол и щелочной реагент | Сопряжённая система ненасыщенного лактона | Фиолетовая или синевато-фиолетовая | Подтверждает наличие реакционноспособного ненасыщенного лактонного фрагмента |
| Балье | Пикриновая кислота или пикрат натрия в щелочной среде | Ненасыщенное лактонное кольцо сердечных гликозидов | Оранжевая или оранжево-красная | Используется как цветная качественная реакция на карденолидный фрагмент |
| Легаля | Нитропруссид натрия, пиридин и щёлочь | α,β-Ненасыщенный лактон; реагент не относится к ароматическим нитропроизводным | Розовая, красная или пурпурная | Сравнительная проба на сердечные гликозиды, основанная на иной химической системе |
| Насыщенный лактон | Те же цветные реагенты | Отсутствует сопряжённая двойная связь | Окраска отсутствует или выражена слабо | Отрицательный результат не исключает лактон как функциональную группу, но снижает вероятность α,β-ненасыщенного лактона |
| Диазореактивы и ароматические амины | Диазониевые соли, первичные ароматические амины | Фенольные, аминные и другие ароматические центры | Окраска азосоединения при подходящем субстрате | Не являются специфической группой реагентов для обнаружения лактонного кольца |
Результат цветной реакции следует оценивать вместе с данными тонкослойной хроматографии и другими реакциями на сердечные гликозиды. Интенсивность окраски зависит от концентрации вещества, свежести щелочного раствора и времени наблюдения. Наиболее информативно сочетание положительной реакции на ненасыщенный лактон с подтверждением стероидного ядра и углеводной части гликозида. Таким образом, ароматические нитропроизводные служат группой реагентов для качественного выявления специфического лактонного фрагмента, а не для общего определения всех лактонов.