2) рассеиванию
3) поглощению
4) вращению плоскости поляризации
Рефрактометрия основана на изменении направления распространения светового луча при переходе из одной оптически прозрачной среды в другую. Это явление характеризуют показателем преломления — отношением скорости света в вакууме к скорости света в исследуемой среде. Количественная связь между углами падения и преломления описывается законом Снеллиуса.
Показатель преломления зависит от химического состава, концентрации растворённого вещества, температуры и длины волны света. Поэтому измерение проводят при строго установленных условиях, обычно при температуре 20 °C и с использованием монохроматического света D-линии натрия. В фармацевтическом анализе рефрактометрию применяют для идентификации жидких веществ, оценки их чистоты и определения концентрации компонентов в растворах по градуировочным таблицам или расчётным формулам.
Поглощение света лежит в основе спектрофотометрии, вращение плоскости поляризации — поляриметрии, а рассеяние — нефелометрических и турбидиметрических методов. Следовательно, определяющим физическим явлением для рефрактометрического анализа является именно преломление света на границе сред.
| Метод анализа | Физическое явление | Измеряемая величина | Типичное применение |
|---|---|---|---|
| Рефрактометрия | Преломление света | Показатель преломления | Идентификация, оценка чистоты и концентрации прозрачных жидкостей |
| Спектрофотометрия | Поглощение электромагнитного излучения | Оптическая плотность | Количественное определение веществ, имеющих собственное поглощение или окрашенные производные |
| Поляриметрия | Вращение плоскости поляризации | Угол оптического вращения | Анализ оптически активных веществ, включая сахара и некоторые лекарственные субстанции |
| Нефелометрия | Рассеяние света частицами | Интенсивность рассеянного света | Определение малых концентраций взвешенных частиц и продуктов иммунных реакций |
| Турбидиметрия | Ослабление света вследствие рассеяния | Интенсивность прошедшего света | Оценка мутности суспензий и количественное определение дисперсной фазы |
| Флуориметрия | Люминесценция после поглощения излучения | Интенсивность флуоресценции | Высокочувствительное определение флуоресцирующих соединений |
Рефрактометрический метод отличается быстротой, малым расходом исследуемого вещества и отсутствием необходимости проводить химическую реакцию. Его достоверность зависит от точного поддержания температуры и отсутствия пузырьков, механических примесей и помутнения образца. Поскольку показатель преломления не всегда специфичен для отдельного соединения, при контроле качества его сопоставляют с нормативным диапазоном и результатами других фармакопейных испытаний.