2) 190-380 (+)
3) 380-780
4) 280-780
В фармацевтической химии при проведении электронной спектрофотометрии ультрафиолетовую область обычно принимают в диапазоне 190–380 нм, поэтому правильным является вариант 2. Нижняя граница связана с практическими возможностями измерения: ниже 190 нм многие растворители и компоненты воздуха интенсивно поглощают излучение, а работа требует вакуумной оптики. Верхняя граница соответствует началу видимой области, где излучение воспринимается глазом и регистрируется как окрашенное.
Поглощение УФ-излучения молекулами обусловлено электронными переходами между энергетическими уровнями, прежде всего переходами π→π* и n→π*. Спектр поглощения характеризуется максимумом при определённой длине волны и величиной оптической плотности; эти параметры используют для идентификации и количественного определения лекарственных веществ, биологически активных соединений и компонентов лекарственного растительного сырья. При количественном анализе применяется закон Бугера—Ламберта—Бера, согласно которому оптическая плотность в пределах соблюдения закона прямо пропорциональна концентрации вещества.
Диапазон 200–480 нм частично выходит в видимую область, 380–780 нм относится преимущественно к видимому излучению, а 280–780 нм объединяет ультрафиолетовую и видимую области. Поэтому эти варианты не соответствуют принятому в фармацевтическом анализе рабочему определению УФ-диапазона.
| Спектральная область | Диапазон, нм | Основная характеристика | Применение в фармацевтическом анализе |
|---|---|---|---|
| Вакуумная ультрафиолетовая | 100–190 | Сильное поглощение кислорода и многих материалов; необходимы специальные условия | Ограниченное использование в рутинной фармацевтической спектрофотометрии |
| Ультрафиолетовая коротковолновая | 190–280 | Преимущественно электронные переходы в сопряжённых и ароматических системах | Идентификация и количественное определение органических лекарственных веществ |
| Ультрафиолетовая длинноволновая | 280–380 | Область переходов n→π* и поглощения хромофоров с расширенной системой сопряжения | Анализ флавоноидов, фенольных соединений, алкалоидов и других биологически активных веществ |
| Ультрафиолетовая область в фармакопейной спектрофотометрии | 190–380 | Рабочий диапазон, принятый для большинства УФ-спектрофотометров | Регистрация спектров, определение максимумов поглощения и расчёт содержания вещества |
| Видимая область | 380–780 | Излучение воспринимается как цвет; поглощение связано с окраской соединения | Фотометрическое определение окрашенных веществ и продуктов цветных реакций |
| Ближняя инфракрасная область | 780–2500 | Преимущественно колебательные обертоны и комбинационные полосы | Экспресс-контроль сырья, лекарственных форм и однородности продукции |
Для работы в УФ-диапазоне используют кварцевые кюветы, поскольку обычное стекло поглощает коротковолновое излучение. Источником излучения обычно служит дейтериевая лампа, обеспечивающая стабильный спектр в ультрафиолетовой области. При интерпретации результатов необходимо учитывать растворитель, материал кюветы, концентрацию образца и соответствие измеренной длины волны фармакопейной методике.