2) УФ-спектроскопии
3) тонкослойной хроматографии
4) высокоэффективной жидкостной хроматографии (+)
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) позволяет одновременно подтвердить подлинность цефтриаксона натрия и определить его содержание. После введения раствора препарата компоненты разделяются в хроматографической системе, а основной пик идентифицируют по времени удерживания в сравнении с пиком стандартного образца. Количественное содержание рассчитывают по площади пика испытуемого раствора относительно площади пика раствора сравнения с учетом концентраций и навесок.
Выбор ВЭЖХ обусловлен ее высокой селективностью и специфичностью: метод разделяет цефтриаксон, продукты его распада и возможные примеси, поэтому позволяет контролировать не только концентрацию действующего вещества, но и качество субстанции. Для достоверности анализа оценивают пригодность хроматографической системы, включая повторяемость площадей пиков, эффективность колонки и разрешение между аналитическим пиком и соседними примесями.
ИК-спектроскопия обычно хорошо подтверждает наличие характерных функциональных групп, а УФ-спектроскопия — поглощение хромофорной системы, однако эти методы могут быть недостаточно специфичными для количественного определения в присутствии примесей и продуктов деградации. Тонкослойная хроматография преимущественно используется как идентификационный или ориентировочно-контрольный метод и уступает ВЭЖХ по точности и воспроизводимости количественного анализа.
| Критерий | ВЭЖХ | ИК-спектроскопия | УФ-спектроскопия | Тонкослойная хроматография |
|---|---|---|---|---|
| Подтверждение подлинности | По времени удерживания основного пика относительно стандартного образца | По совокупности полос поглощения, характерных для структуры вещества | По положению и интенсивности максимумов поглощения | По положению зоны и ее соответствию стандарту |
| Количественное определение | По площади хроматографического пика с использованием стандартного раствора | Обычно не является основным фармакопейным методом количественного анализа | Возможно по оптической плотности, но специфичность может быть недостаточной | Чаще полуколичественное; точность ниже, чем при ВЭЖХ |
| Разделение компонентов | Разделяет действующее вещество, примеси и продукты деградации | Разделения компонентов смеси не происходит | Разделения компонентов смеси не происходит | Разделение возможно, но разрешение и воспроизводимость обычно ниже |
| Специфичность анализа | Высокая при соблюдении условий методики и пригодности системы | Высока для структурной идентификации, но ограничена при анализе смеси | Ограничена перекрыванием спектров сопутствующих веществ | Средняя; зависит от сорбента, элюента и визуализации зон |
| Контроль примесей | Позволяет выявлять и оценивать родственные примеси и продукты распада | Как правило, не позволяет раздельно оценить примеси | Не обеспечивает надежного раздельного контроля примесей | Возможен качественный или ориентировочный контроль |
| Роль в нормативной документации | Основной метод для комплексного установления подлинности и количественного определения | Дополнительный метод подтверждения структуры | Дополнительный спектрофотометрический метод | Вспомогательный метод идентификации или контроля примесей |
Таким образом, правильным является выбор ВЭЖХ, поскольку один валидированный метод обеспечивает получение двух ключевых показателей качества. Идентификационным критерием служит соответствие времени удерживания, а количественным критерием — площадь пика цефтриаксона относительно стандартного образца. Дополнительное преимущество метода заключается в возможности одновременно оценивать специфичность и чистоту лекарственной субстанции.