2) стимуляции Т-клеток пептидами моделирования ESAT-6 и CFP-10 антигенов, которые отсутствуют во всех штаммах БЦЖ
3) реакции гиперчувствительности замедленного типа к антигену двух белков (ESAT6/CFP10), синтез которых кодируется в геноме M. tuberculosis humanus (+)
4) количественном определении интерферона INF-?, высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими антигенами (ESAT-6, CFP-10) M.tuberculosis humanus
Правильный ответ — реакция гиперчувствительности замедленного типа к двум специфическим антигенам микобактерий туберкулёза: ESAT-6 и CFP-10. Действующее вещество препарата представляет собой рекомбинантный белок CFP10-ESAT6, содержащий оба антигенных компонента. Эти белки связаны с вирулентными представителями комплекса Mycobacterium tuberculosis и отсутствуют в вакцинном штамме БЦЖ, поэтому проба обладает большей специфичностью в отношении туберкулёзной инфекции, чем проба Манту.
После внутрикожного введения антигены распознаются ранее сенсибилизированными Т-лимфоцитами преимущественно Th1-типа. Активация клеточного иммунитета сопровождается выделением цитокинов, привлечением моноцитов и лимфоцитов и формированием локального инфильтрата — проявления гиперчувствительности IV типа. Результат оценивают через 72 часа по поперечному размеру инфильтрата; гиперемию учитывают только при отсутствии папулы.
Диаскинтест является кожной пробой in vivo, а не лабораторным исследованием крови. Количественное определение интерферона-γ после стимуляции лимфоцитов антигенами ESAT-6 и CFP-10 относится к тестам высвобождения интерферона-γ — IGRA. Следовательно, наличие тех же антигенов не делает методы тождественными: при Диаскинтесте регистрируют кожный клеточно-опосредованный ответ, а при IGRA — продукцию интерферона-γ сенсибилизированными Т-клетками in vitro.
| Сравнительный признак | Диаскинтест | Проба Манту | IGRA |
|---|---|---|---|
| Иммунологический принцип | Кожная гиперчувствительность замедленного типа | Кожная гиперчувствительность замедленного типа | Высвобождение интерферона-γ Т-лимфоцитами in vitro |
| Антигенная основа | Рекомбинантный белок CFP10-ESAT6 | Очищенный туберкулин — смесь микобактериальных антигенов | Специфические антигены или пептиды ESAT-6 и CFP-10 |
| Условия проведения | Внутрикожное введение на предплечье | Внутрикожное введение на предплечье | Исследование венозной крови в лаборатории |
| Оцениваемый показатель | Диаметр инфильтрата в миллиметрах | Диаметр инфильтрата в миллиметрах | Концентрация интерферона-γ либо число реагирующих Т-клеток |
| Срок оценки | Через 72 часа | Обычно через 72 часа | После лабораторной инкубации образца |
| Влияние вакцинации БЦЖ | Как правило, не вызывает положительной реакции | Возможна поствакцинальная реакция | Результат обычно не зависит от БЦЖ |
| Диагностическое значение | Выявляет иммунную сенсибилизацию к специфическим антигенам M. tuberculosis | Выявляет сенсибилизацию к более широкому набору микобактериальных антигенов | Выявляет специфический Т-клеточный ответ по образцу крови |
Положительная проба свидетельствует о наличии специфического клеточного иммунного ответа, но сама по себе не позволяет разграничить латентную туберкулёзную инфекцию и активное заболевание. Пациенту требуется комплексное обследование, включающее клиническую оценку, лучевую диагностику и при наличии показаний микробиологические или молекулярно-генетические исследования. Отрицательный результат не исключает туберкулёз при выраженном иммунодефиците или тяжёлом течении заболевания, когда специфический Т-клеточный ответ может быть ослаблен. Диаскинтест также не применяют для отбора пациентов на вакцинацию или ревакцинацию БЦЖ.