2) посев на твердые питательные среды
3) микроскопию мазков (+)
4) посев на жидкие питательные среды
В лабораториях общей лечебной сети основным доступным методом первичного выявления микобактерий туберкулёза является микроскопия мазков мокроты с окраской на кислотоустойчивые микобактерии (КУМ). При классической окраске по Цилю—Нильсену микобактерии сохраняют карболовый фуксин после обработки кислотно-спиртовым раствором благодаря высокому содержанию миколовых кислот в клеточной стенке. При люминесцентной микроскопии используют флуорохромы, что повышает вероятность обнаружения возбудителя.
Положительный результат означает выявление кислотоустойчивых бактерий и указывает на значительное бактериовыделение, а следовательно, на повышенную эпидемиологическую опасность пациента. Однако микроскопия не позволяет достоверно отличить Mycobacterium tuberculosis от нетуберкулёзных микобактерий и обладает ограниченной чувствительностью, особенно при малом количестве возбудителя. Поэтому отрицательный мазок не исключает туберкулёз, а окончательная видовая идентификация и определение лекарственной устойчивости требуют культуральных или молекулярно-генетических исследований.
Посев на плотные и жидкие питательные среды, а также гибридизационные технологии обычно выполняются в специализированных бактериологических или молекулярно-генетических лабораториях противотуберкулёзной службы. Эти методы требуют специального оборудования, соблюдения повышенных требований биологической безопасности и более сложной организации исследования. Именно поэтому в условиях общей лечебной сети для первичного лабораторного обследования наиболее характерна бактериоскопия мазков.
| Метод | Принцип | Основной результат | Типичное место применения |
|---|---|---|---|
| Микроскопия по Цилю—Нильсену | Сохранение фуксина кислотоустойчивой клеточной стенкой | Обнаружение КУМ в мазке, ориентировочная оценка массивности бактериовыделения | Лаборатории общей лечебной сети и специализированные лаборатории |
| Люминесцентная микроскопия | Связывание флуорохрома с микобактериями и выявление их в люминесцентном микроскопе | Более высокая чувствительность по сравнению с обычной световой микроскопией | Оснащённые лаборатории противотуберкулёзной службы |
| Посев на плотные среды | Размножение жизнеспособных микобактерий на твёрдой питательной среде | Подтверждение жизнеспособности возбудителя, выделение культуры, тестирование лекарственной чувствительности | Специализированные бактериологические лаборатории |
| Посев на жидкие среды | Рост микобактерий в жидкой системе с автоматизированной регистрацией размножения | Более быстрое обнаружение культуры по сравнению с плотными средами | Лаборатории с современными системами культивирования |
| Гибридизационные технологии | Связывание специфических нуклеотидных зондов с ДНК или РНК возбудителя | Видовая идентификация и, в отдельных тест-системах, выявление генетических маркеров устойчивости | Молекулярно-генетические лаборатории |
Микроскопия мазка особенно важна при обследовании пациентов с кашлем и продукцией мокроты, поскольку позволяет быстро выявить наиболее заразные формы туберкулёза. Для повышения информативности исследуют несколько образцов, предпочтительно качественно собранной утренней мокроты. При отрицательном результате сохраняются показания к лучевой диагностике, молекулярному тестированию и культуральному исследованию при наличии клинических или рентгенологических признаков заболевания.