2) CD19 (+)
3) CD33
4) CD20
Перед назначением анти-CD19 CAR-T-клеток необходимо подтвердить наличие и количественно оценить экспрессию CD19 на опухолевых В-лимфобластах. CD19 — мембранный В-клеточный антиген, обычно экспрессируемый на большинстве клеток-предшественников при В-линейном ОЛЛ. Оценку проводят методом многопараметрической проточной цитометрии: определяют долю CD19-положительных бластов, интенсивность экспрессии антигена и, при необходимости, абсолютное количество клеток-мишеней.
CD19 является непосредственной мишенью химерного антигенного рецептора CAR. После связывания CAR-T-клетки с CD19 активируются, пролиферируют и вызывают цитотоксическое уничтожение опухолевых клеток независимо от представления антигена молекулами HLA. Недостаточная экспрессия CD19 или появление CD19-негативного клона повышают риск неполного ответа и антиген-негативного рецидива, поэтому исходная оценка антигенной нагрузки имеет значение для выбора и прогнозирования эффективности терапии.
| Маркер | Типичная экспрессия при В-линейном ОЛЛ | Значение для антиген-направленной терапии |
|---|---|---|
| CD19 | Характерен для В-клеток-предшественников и большинства В-лимфобластов; оцениваются процент позитивных клеток и интенсивность сигнала | Основная мишень анти-CD19 CAR-T-клеток; наличие антигена необходимо для распознавания опухоли |
| CD22 | В-клеточный антиген, часто выявляется при В-ОЛЛ, но его экспрессия может отличаться от CD19 | Может использоваться как самостоятельная или комбинированная терапевтическая мишень, но не определяет пригодность именно анти-CD19 CAR-T |
| CD20 | Чаще характерен для более зрелых В-клеток; при В-ОЛЛ экспрессируется вариабельно | Может служить мишенью анти-CD20-препаратов, однако отсутствие CD20 не исключает В-лимфобластный лейкоз и не является основанием для применения анти-CD19 CAR-T |
| CD33 | Преимущественно миелоидный маркер; иногда выявляется аберрантно при лимфобластных неоплазиях | Не является стандартной мишенью для терапии В-ОЛЛ анти-CD19 CAR-T-клетками |
| Антигенная плотность | Отражает количество молекул CD19 на поверхности одной опухолевой клетки и оценивается по интенсивности флуоресценции | Низкая плотность CD19 может снижать эффективность распознавания и способствовать селекции антиген-негативного клона |
| Минимальная остаточная болезнь | Определяется высокочувствительной проточной цитометрией или молекулярными методами после лечения | Позволяет оценивать глубину ответа, но для выбора CD19-направленной терапии первоначально принципиально подтверждение CD19 на опухолевых клетках |
Таким образом, правильным является определение количества CD19-положительных клеток. Результат должен интерпретироваться вместе с морфологией, иммунофенотипом бластов и оценкой минимальной остаточной болезни. После введения CAR-T-клеток требуется мониторинг ответа и возможной потери CD19, поскольку антигенный иммунный уклон является одним из механизмов рецидива. Ожидаемым фармакодинамическим эффектом терапии может быть аплазия В-клеток, отражающая активность CD19-направленного лечения.