2) CD22
3) CD45
4) CD20 (+)
CD20 — трансмембранный белок В-клеток, экспрессирующийся преимущественно на поздних пре-В- и зрелых В-лимфоцитах. При В-линейном остром лимфобластном лейкозе экспрессия CD20 на бластах вариабельна: она может отсутствовать, быть выявлена на части клеток или характеризоваться разной плотностью антигена. Ритуксимаб является анти-CD20 моноклональным антителом; после связывания с CD20 он вызывает лизис опухолевых клеток через комплемент-зависимую цитотоксичность, антителозависимую клеточную цитотоксичность и другие эффекторные механизмы.
Поэтому перед включением ритуксимаба в программу лечения методом многопараметрической проточной цитометрии определяют долю бластных клеток, экспрессирующих CD20, а также интенсивность экспрессии антигена. В ряде протоколов клинически значимой считают экспрессию CD20 не менее чем на 20% бластов, однако конкретный порог зависит от используемого протокола и диагностической лаборатории. Важно оценивать именно CD20 на лейкемических бластах, а не общее количество CD20-положительных В-лимфоцитов в образце.
CD19 и CD22 подтверждают В-клеточную принадлежность опухолевого клона, но не являются мишенью ритуксимаба. CD45 используется главным образом для идентификации лейкоцитов и выделения бластной популяции по характерной слабой или неоднородной экспрессии. Таким образом, определение CD20-положительных клеток имеет непосредственное значение для обоснования анти-CD20 терапии и прогнозирования вероятности ее эффекта.
| Маркер | Основная диагностическая роль | Значение при выборе терапии |
|---|---|---|
| CD20 | Маркер поздней В-клеточной дифференцировки; экспрессия на бластах при В-ОЛЛ вариабельна | Прямая мишень ритуксимаба; оценивают процент CD20-положительных бластов и плотность антигена |
| CD19 | Пан-В-клеточный маркер, обычно ярко экспрессируется при В-линейном ОЛЛ | Подтверждает В-линейность; не определяет чувствительность к ритуксимабу |
| CD22 | В-клеточный дифференцировочный антиген, часто выявляется на В-лимфобластах | Не является мишенью ритуксимаба; может иметь значение для терапии анти-CD22 препаратами |
| CD45 | Общий лейкоцитарный антиген; помогает отличать бласты от нелимфоидных клеток и эритроидных элементов | Используется для гейтирования и характеристики бластной популяции, но не для назначения анти-CD20 терапии |
| CD79a и PAX5 | Подтверждают В-клеточную направленность дифференцировки в сочетании с другими маркерами | Диагностически важны, но не служат мишенью ритуксимаба |
| CD10 | Частый маркер предшественников В-клеточного ряда; характеризует иммунологический фенотип В-ОЛЛ | Помогает классифицировать заболевание, но не отражает возможность анти-CD20 воздействия |
Отсутствие CD20 или его низкая экспрессия ограничивает ожидаемую пользу ритуксимаба, поскольку препарат не может эффективно связаться с большинством опухолевых клеток. Гетерогенность экспрессии требует оценки не только процента позитивных бластов, но и интенсивности флуоресценции. При рецидиве или после лечения иммунный фенотип может изменяться, поэтому CD20 целесообразно повторно исследовать, если рассматривается продолжение анти-CD20 терапии. Решение о лечении принимают в совокупности с данными о генетических аномалиях, общем риске и минимальной остаточной болезни.