2) дефосфорилирование
3) метилирование
4) фосфорилирование (+)
При хроническом миелолейкозе формируется химерный ген BCR::ABL1 вследствие реципрокной транслокации t(9;22)(q34.1;q11.2) с образованием филадельфийской хромосомы. Кодируемая им тирозинкиназа BCR-ABL обладает конститутивной, то есть постоянно активной, ферментативной активностью, не зависящей от нормальной регуляции ABL1. Она переносит фосфатную группу с АТФ на тирозиновые остатки собственных белков и белков-мишеней, активируя сигнальные пути RAS/MAPK, PI3K/AKT и JAK/STAT.
Ингибиторы тирозинкиназ, прежде всего иматиниб, нилотиниб, дазатиниб и бозутиниб, подавляют каталитическую активность BCR-ABL за счёт взаимодействия с АТФ-связывающим участком или, для препарата асциминиба, с аллостерическим миристоильным карманом. В результате блокируются аутофосфорилирование BCR-ABL и фосфорилирование его субстратов, прекращается передача пролиферативных и антиапоптотических сигналов, что приводит к снижению опухолевого клона. Поэтому правильным механизмом является именно ингибирование фосфорилирования, а не дефосфорилирование, метилирование или убиквитинирование.
Эффективность терапии оценивают не только по клиническим проявлениям и показателям общего анализа крови, но и по молекулярному ответу. Количественная ПЦР транскрипта BCR::ABL1 в международной шкале позволяет контролировать глубину ответа и своевременно выявлять резистентность. Одной из причин потери ответа являются мутации киназного домена BCR-ABL, изменяющие связывание препарата; их выявление помогает выбрать последующую линию терапии.
| Показатель | Характеристика | Клиническое значение |
|---|---|---|
| Генетическая основа | t(9;22)(q34.1;q11.2), образование филадельфийской хромосомы и гена BCR::ABL1 | Ключевой молекулярный маркер хронического миелолейкоза |
| Ферментативная активность | Конститутивная тирозинкиназная активность химерного белка | Поддерживает пролиферацию и выживание лейкозных клеток |
| Основной субстрат действия | АТФ-зависимое фосфорилирование тирозиновых остатков BCR-ABL и сигнальных белков | Запускает внутриклеточные пути RAS/MAPK, PI3K/AKT и JAK/STAT |
| Механизм большинства ТКИ | Конкурентное связывание с АТФ-связывающим участком киназного домена | Предотвращает перенос фосфатной группы и выключает сигнальную активность |
| Аллостерический подход | Асциминиб связывается с миристоильным карманом BCR-ABL | Позволяет ингибировать киназу по механизму, отличному от АТФ-конкурентного |
| Молекулярный контроль ответа | Количественная ПЦР BCR::ABL1 в международной шкале | Используется для оценки раннего, полного цитогенетического и глубокого молекулярного ответа |
| Механизм резистентности | Мутации киназного домена BCR-ABL, усиление экспрессии или альтернативные клеточные механизмы | Может потребовать смены ТКИ и проведения молекулярного анализа |
Фосфорилирование является центральным биохимическим звеном патогенеза хронического миелолейкоза и основной мишенью таргетной терапии. Подавление активности BCR-ABL отличает ТКИ от цитостатиков, которые воздействуют преимущественно на делящиеся клетки без специфического молекулярного адресата. Наличие транскрипта BCR::ABL1 подтверждают методами ПЦР, FISH или цитогенетического исследования в зависимости от клинической ситуации. Регулярный молекулярный мониторинг позволяет оценивать эффективность лечения и обнаруживать резистентность до клинического прогрессирования.