2) CTG
3) CBG (+)
4) QFQ
В международной цитогенетической номенклатуре обозначение CBG соответствует методу C-окраски хромосом: C — выявление конститутивного гетерохроматина, B — предварительная обработка гидроксидом бария, G — окрашивание по Гимзе. Получаемый рисунок называют C-бэндингом; наиболее интенсивно окрашиваются центромерные и перицентромерные участки, содержащие высокоповторяющуюся, поздно реплицирующуюся ДНК.
Механизм метода основан на денатурации хромосомного материала гидроксидом бария с последующей обработкой в солевом растворе и окраской красителем Гимзы. После такой процедуры участки конститутивного гетерохроматина сохраняют способность интенсивно связывать краситель и визуализируются как тёмные C-полосы. Особенно информативно исследование гетерохроматиновых вариантов хромосом 1, 9 и 16, а также длинного плеча Y-хромосомы.
Обозначения QFQ и QFH относятся к вариантам Q-окраски с использованием флуоресцентных красителей, поэтому они не описывают классический C-бэндинг. Вариант CBG является стандартизированным кодом именно для выявления конститутивного гетерохроматина. Знак + в тестовом задании отмечает правильный ответ и не является обязательной частью лабораторного обозначения метода.
| Метод или обозначение | Основной реагент или принцип | Преимущественно выявляемые структуры | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| CBG | Гидроксид бария с последующим окрашиванием по Гимзе | Конститутивный гетерохроматин, главным образом перицентромерные участки | Оценка C-полиморфизма, идентификация гетерохроматиновых вариантов и отдельных маркерных хромосом |
| GTG | Трипсинизация и окрашивание по Гимзе | Чередующиеся эухроматиновые и гетерохроматиновые полосы по длине хромосом | Стандартный анализ кариотипа и выявление числовых и структурных перестроек |
| QFQ | Флуоресцентное окрашивание производными акридина, прежде всего хинакрином | Участки с повышенным содержанием аденина и тимина; характерное свечение Y-хромосомы | Флуоресцентная идентификация хромосом и отдельных повторяющихся последовательностей |
| QFH | Q-окраска с применением флуорохрома Hoechst 33258 | AT-богатые участки ДНК | Вариант флуоресцентного бэндинга, отличающийся от C-окраски химическим принципом и характером сигнала |
| RBG | Включение 5-бромдезоксиуридина с последующим окрашиванием по Гимзе | R-полосы, формирующие рисунок, обратный G-бэндингу; хорошо видны терминальные области | Уточнение перестроек в дистальных отделах хромосом |
| Ag-NOR | Импрегнация серебром белков активно работающих ядрышковых организаторов | Регионы NOR на коротких плечах акроцентрических хромосом | Оценка функционально активных участков, связанных с синтезом рибосомной РНК |
Результаты C-бэндинга интерпретируют вместе с обычным кариотипированием и другими видами дифференциальной окраски. Выраженность C-полос может варьировать как индивидуальный гетероморфизм и сама по себе не всегда свидетельствует о патологии. При подозрении на структурную перестройку CBG помогает отличить изменения гетерохроматина от нарушений эухроматиновых участков. Для детального анализа небольших делеций или дупликаций необходимы молекулярно-цитогенетические методы, включая FISH и хромосомный микроматричный анализ.